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Cy3-OVA,CY3標(biāo)記卵清蛋白的合成及純化過程
發(fā)布時間:2025-07-30     作者:axc   分享到:

Cy3-OVA,CY3標(biāo)記卵清蛋白的合成及純化過程

CY3標(biāo)記的卵清蛋白(Cy3-OVA)是通過將熒光染料CY3共價偶聯(lián)于卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)分子上的標(biāo)記產(chǎn)物。卵清蛋白作為一種常用的模型蛋白,具有穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)和良好的水溶性,常用于蛋白質(zhì)功能研究和生物標(biāo)記實驗。將CY3染料引入OVA,使其具備熒光特性,便于進(jìn)行分子追蹤、結(jié)合分析和成像研究。

合成過程中,首先準(zhǔn)備活性的CY3-NHS酯試劑,該試劑能夠與蛋白質(zhì)中的伯胺基團(tuán)(主要來自賴氨酸殘基和蛋白N端)發(fā)生酰胺化反應(yīng)。一般采用pH 8.0至8.5的碳酸鹽緩沖液,以保證蛋白氨基非質(zhì)子化狀態(tài),增強(qiáng)親核性,促進(jìn)偶聯(lián)反應(yīng)的進(jìn)行。

反應(yīng)體系中,將CY3-NHS酯溶液緩慢滴加至OVA蛋白溶液中,攪拌反應(yīng)數(shù)小時,避免強(qiáng)光照射以防止染料光降解。反應(yīng)溫和且時間適中,有利于保持蛋白的空間構(gòu)象和功能完整。

合成完成后,需對產(chǎn)物進(jìn)行純化以去除未反應(yīng)的游離染料及低分子雜質(zhì)。常用方法包括透析、凝膠過濾色譜(SEC)或超濾。透析通過半透膜緩慢去除小分子雜質(zhì),凝膠過濾根據(jù)分子大小分離染料標(biāo)記的蛋白與自由染料,超濾則利用分子量截留實現(xiàn)純化。

純化后的Cy3-OVA通常通過紫外-可見分光光度計檢測吸光度,確認(rèn)染料與蛋白的結(jié)合比例(標(biāo)記度)。同時,熒光光譜分析用以評估標(biāo)記的熒光性能。SDS-PAGE結(jié)合熒光成像也常用于檢測純度和標(biāo)記均一性。

整個合成及純化流程注重溫和條件和完整性保持,確保標(biāo)記蛋白具備良好的溶解性、穩(wěn)定性及功能活性。該標(biāo)記蛋白應(yīng)用于免疫學(xué)研究、細(xì)胞攝取追蹤以及生物分子互作分析。

產(chǎn)品名稱:Cy3-OVA,CY3標(biāo)記卵清蛋白

純度:95%+

性狀:固體或液體

儲藏條件:-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

廠家:齊岳生物

Cy3-OVA

關(guān)于我們

齊岳生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團(tuán)的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯(lián)。可選擇多種功能團(tuán)與目標(biāo)分子進(jìn)行精準(zhǔn)結(jié)合,實現(xiàn)對蛋白質(zhì)、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標(biāo)記服務(wù),包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標(biāo)的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應(yīng)用。

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僅供科研,不能用于人體實驗AXC.2025.06.23


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