CY3-Streptavidin,CY3標(biāo)記鏈霉親和素的純化與表征
CY3標(biāo)記的鏈霉親和素(Cy3-Streptavidin)是通過將熒光染料CY3共價(jià)偶聯(lián)于鏈霉親和素蛋白上的產(chǎn)物。其制備完成后,純化和表征過程是確保標(biāo)記物質(zhì)量和性能的關(guān)鍵步驟。
純化通常采用凝膠過濾色譜(Size Exclusion Chromatography,SEC)或透析技術(shù),以去除未反應(yīng)的游離CY3染料和其他小分子雜質(zhì)。凝膠過濾利用分子大小差異,將較大的Cy3-Streptavidin復(fù)合物與較小的游離染料分離開來,保證產(chǎn)物的純凈度。透析則通過半透膜實(shí)現(xiàn)溶液中雜質(zhì)的擴(kuò)散移除。純化后的產(chǎn)品通常被凍干或冷藏保存,以維持其穩(wěn)定性。
表征方面,首先通過紫外-可見分光光度計(jì)測定樣品的吸收光譜。Cy3染料在約550 nm處有明顯的吸收峰,鏈霉親和素蛋白則在280 nm處有特征吸收。通過比值計(jì)算,可以估算標(biāo)記率,即染料分子與蛋白分子的結(jié)合比例。合適的標(biāo)記率確保熒光信號(hào)強(qiáng)度與蛋白功能之間的平衡。
熒光光譜分析則用于測定Cy3-Streptavidin的發(fā)射特性。Cy3染料的激發(fā)峰在約550 nm,發(fā)射峰在約570 nm,熒光強(qiáng)度反映了標(biāo)記的有效性和染料的光穩(wěn)定性。
此外,SDS-PAGE電泳結(jié)合熒光成像技術(shù)用于檢測蛋白的純度和標(biāo)記均一性。標(biāo)記后的鏈霉親和素在凝膠中顯示特定的分子量條帶,伴隨熒光信號(hào),可確認(rèn)偶聯(lián)的成功與蛋白的完整性。
動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和質(zhì)譜分析也常用于進(jìn)一步確認(rèn)標(biāo)記蛋白的分子量分布和結(jié)構(gòu)完整性。DLS能夠監(jiān)測蛋白聚集狀態(tài),質(zhì)譜則可鑒定偶聯(lián)的染料數(shù)量和結(jié)合位點(diǎn)。
綜上,CY3標(biāo)記的鏈霉親和素經(jīng)過嚴(yán)格的純化和多維度表征,確保其具備優(yōu)良的純度、穩(wěn)定性和功能活性,為后續(xù)的生物成像、分子捕獲及生物傳感等應(yīng)用提供可靠基礎(chǔ)。
產(chǎn)品名稱:CY3-Streptavidin,CY3標(biāo)記鏈霉親和素
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
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