Cy3-SA,CY3標記鏈霉親和素的化學反應原理
CY3標記的鏈霉親和素(Cy3-SA)是通過將CY3熒光染料的活性基團與鏈霉親和素蛋白的可反應側鏈進行共價偶聯而形成的復合物。該偶聯過程的核心是CY3-NHS酯(N-羥基琥珀酰亞胺酯)與鏈霉親和素分子中賴氨酸殘基的伯胺基之間的親核酰胺化反應。
具體來說,CY3-NHS酯作為一種活潑的酯類化合物,在堿性緩沖體系(pH 8.0-8.5)中,NHS酯的酯鍵易被鏈霉親和素蛋白上的氨基親核攻擊。此反應產生一個過渡態的四面體中間體,隨后NHS基團離去,形成穩定的酰胺鍵,從而實現染料與蛋白質的共價連接。
該化學反應具有高度的選擇性,主要針對蛋白中的自由氨基,且反應條件溫和,能夠保證鏈霉親和素蛋白的構象和功能保持完整。反應溫度一般控制在室溫,時間從數十分鐘到數小時不等,以確保充分標記且避免蛋白質變性。
偶聯后,Cy3染料的芳香族結構使其具有優異的光學性質,包括高量子效率和較強的光穩定性。該標記使鏈霉親和素蛋白在保持對生物素高親和力的同時,兼具熒光檢測能力。
反應完成后,通常通過透析、凝膠過濾或超濾技術去除未反應的游離染料,確保標記物的純度。該純化過程保證了Cy3-SA的性能穩定,適合于后續的熒光成像和生物分子捕獲實驗。
總結而言,CY3標記的鏈霉親和素的化學反應原理基于NHS酯-伯胺的酰胺化反應,這一經典且高效的偶聯方式,實現了染料與蛋白質的穩定連接,兼具生物功能與熒光性能,應用于多種生物化學和分子生物學實驗。
產品名稱:Cy3-SA,CY3標記鏈霉親和素
純度:95%+
性狀:固體或液體
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
廠家:齊岳生物
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齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務,如活性酯(NHS酯)、馬來酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合,實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外,齊岳生物還提供定制染料標記服務,包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物,滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。
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