Cy3-dCTP，花菁類熒光染料CY3共價連接至脫氧胞苷三磷酸的反應步驟

Cy3-dCTP 是將花菁類熒光染料 CY3 共價連接至脫氧胞苷三磷酸（dCTP）分子上的熒光核苷酸衍生物，應用于分子生物學實驗，如熒光原位雜交（FISH）、熒光PCR、DNA合成標記、測序等。該標記形式通過在堿基或糖環結構上引入熒光團，實現對核酸合成或模板識別過程的可視化分析。

CY3-dCTP 的合成通常采用核苷酸修飾策略，在保持 dCTP 三磷酸骨架完整性的基礎上，引入一個連接基團（如氨基烷基鏈或氨基酯鏈）作為染料偶聯位點。常用的策略是在 dCTP 的 5-位堿基上引入氨基鏈（如 aminoallyl-dCTP），再通過與 CY3-NHS 酯進行后期修飾形成酰胺鍵。

具體反應步驟如下：

合成氨基修飾核苷酸：以脫氧胞苷為起始物，通過在其C5位引入一個氨基烷基側鏈，得到 aminoallyl-dCTP。該中間體既保持核苷酸原有的堿基配對能力，又引入一個活潑伯胺，用于后續標記。

CY3-NHS 酯制備與活化：CY3通過與N-羥基琥珀酰亞胺反應形成NHS活酯，使染料具備與胺反應的能力。該酯在干燥有機溶劑（如DMSO）中配制，以保持其活性。

偶聯反應：將 aminoallyl-dCTP 溶解于碳酸鹽緩沖液（pH 8.5），加入適量 CY3-NHS 酯（通常以1.2–1.5倍摩爾量），在避光條件下溫和反應 2–4 小時，生成穩定的 CY3-dCTP。整個過程需嚴格避免金屬離子污染和強氧化環境，以防止核苷酸降解。

純化過程：反應后使用離子交換色譜或反相HPLC分離純化，去除未反應染料、緩沖鹽及副產物。純品可進一步凍干保存，確保其三磷酸結構穩定。

驗證與儲存：通過質譜、核磁共振（NMR）及紫外-可見光譜（UV-Vis）進行結構鑒定，確認熒光團成功引入。CY3-dCTP 需冷凍避光儲存（-20°C以下），以維持熒光強度及核苷酸穩定性。

該標記核苷酸可被DNA聚合酶識別并摻入新合成的鏈中，保留其熒光性質，適用于高靈敏度的分子追蹤實驗，具有的實驗室應用價值。

產品名稱：Cy3-dCTP，花菁類熒光染料CY3共價連接至脫氧胞苷三磷酸

純度：95%+

性狀：固體或液體

儲藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

廠家：齊岳生物

關于我們

齊岳生物供應近紅外熒光花菁染料標記各種官能團的定制服務，如活性酯（NHS酯）、馬來酰亞胺（MAL）、疊氮（N?）、炔基（alkyne）等，便于與蛋白質、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價偶聯。可選擇多種功能團與目標分子進行精準結合，實現對蛋白質、多肽、抗體、核酸或納米材料的熒光修飾。此外，齊岳生物還提供定制染料標記服務，包括肽類、蛋白類、小分子、糖類等不同類型標的物，滿足用戶在科研、成像等多方面的個性化應用。

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