CY3.5-Isomaltotetraose,CY3.5標記異麥芽四糖的合成路線
CY3.5標記異麥芽四糖(CY3.5-Isomaltotetraose)是一種結(jié)構(gòu)由四個 α-(1→6)連接的葡萄糖單元組成的低聚糖,通過化學方式引入熒光染料Cy3.5后,可作為示蹤探針用于生物體內(nèi)碳水代謝、菌群生態(tài)及轉(zhuǎn)運研究。其合成路線可分為兩大部分:四糖主體的制備及Cy3.5染料的定向偶聯(lián)。
一、異麥芽四糖的合成
酶催化合成
使用α-葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶(GTF)對麥芽糖或異麥芽糖進行酶促反應,在適當?shù)牡孜餄舛群头磻獣r間條件下,可獲得不同長度的低聚糖。異麥芽四糖在反應產(chǎn)物中濃度較高。
純化分離
產(chǎn)物經(jīng)過Sephadex G-15凝膠過濾或離子交換HPLC層析進行分離,獲得純度大于95%的異麥芽四糖,可進一步通過質(zhì)譜和NMR鑒定確認結(jié)構(gòu)。
二、Cy3.5染料的偶聯(lián)合成路線
還原端胺基化處理
糖類偶聯(lián)一般需要在其還原端引入氨基團。采用還原胺化法將還原端醛基與乙二胺縮合生成穩(wěn)定的胺端糖,為熒光偶聯(lián)提供功能基團。
Cy3.5活化
Cy3.5染料一般以活性酯(如NHS酯)形式使用,適合與伯胺發(fā)生酰胺化反應。
共價偶聯(lián)反應
將氨基化的異麥芽四糖與Cy3.5-NHS酯在碳酸鹽緩沖液中反應,避光條件下攪拌反應4-8小時。反應完成后通過透析或?qū)游鋈コ坞x染料。
純度分析與鑒定
終產(chǎn)物通過UPLC、UV-Vis吸收光譜(Cy3.5峰位約為570 nm)、質(zhì)譜分析等確認結(jié)構(gòu)與標記效率。
產(chǎn)品名稱:CY3.5-Isomaltotetraose
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
推薦產(chǎn)品:
CY3-Quercetin CY3槲皮素
CY3-Rapamycin CY3標記雷帕霉素
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CY3-Schaftoside CY3標記夏佛塔苷
僅用于科研,不能用于人體。小編axc