Transferrin, FITC labeled
FITC標記轉鐵蛋白(Transferrin-FITC)——綠色熒光鐵離子載體與細胞攝取研究工具
一、產品簡介
FITC標記轉鐵蛋白(Transferrin, FITC-labeled)是一種將人源或動物源轉鐵蛋白(Tf)通過共價結合方式標記上綠色熒光染料熒光素異硫氰酸酯(FITC)的生物功能蛋白。轉鐵蛋白是一種結合鐵離子的糖蛋白,廣泛存在于血漿中,主要功能是結合和運輸鐵離子至細胞。FITC標記賦予轉鐵蛋白綠色熒光,實現其在細胞內攝取及轉運過程中的動態追蹤,廣泛應用于細胞生物學、藥物輸送、受體研究和生物成像等領域。
二、轉鐵蛋白(Transferrin)簡介
來源:天然存在于人類及多種哺乳動物血漿中;
分子結構:單鏈糖蛋白,分子量約80 kDa,含兩價鐵結合位點;
生理功能:
高效結合Fe3?離子并運輸至細胞;
通過轉鐵蛋白受體(TfR)介導的受體介導性內吞作用進入細胞;
參與鐵穩態調節,促進細胞生長和代謝;
生物學意義:
轉鐵蛋白受體高度表達于快速增殖細胞及某些腫瘤細胞,成為靶向治療和診斷的熱點;
作為藥物及納米載體的理想靶分子。
三、FITC標記原理與方法
標記原理:
FITC的異硫氰酸酯基團(–N=C=S)可與轉鐵蛋白賴氨酸殘基上的自由氨基(–NH?)共價結合,形成穩定的硫脲鍵;
標記過程控制溫和,大程度保持轉鐵蛋白的三維構象和生物活性;
制備工藝:
在適宜pH緩沖液中,將FITC緩慢加入轉鐵蛋白溶液,輕柔攪拌反應一定時間;
通過透析或凝膠過濾去除游離FITC,獲得純凈的FITC-轉鐵蛋白;
標記度:
標記度需適中,既保證足夠熒光強度,又不影響轉鐵蛋白受體結合活性。
四、產品理化性質
性質 說明
分子量 約80 kDa
熒光特性 激發波長約495 nm,發射波長約520 nm(綠色熒光)
外觀 綠色透明液體或凍干粉
溶解性 良好溶于PBS及其他生理緩沖液
穩定性 避光低溫保存,熒光及蛋白質活性穩定
生物活性 保持轉鐵蛋白對轉鐵蛋白受體(TfR)的高親和力
五、產品性能與特點
1. 高效受體結合能力
FITC標記轉鐵蛋白保留對TfR的高親和性,可模擬天然轉鐵蛋白的細胞攝取機制,適用于受體介導的內吞研究。
2. 明亮穩定的綠色熒光
FITC標記使轉鐵蛋白具有強烈且穩定的綠色熒光信號,便于熒光顯微鏡、流式細胞儀及熒光成像追蹤。
3. 良好的生物相容性
作為天然蛋白標記物,FITC-轉鐵蛋白對細胞毒性低,適合活細胞及體外實驗。
4. 多樣的實驗適用性
可用于細胞攝取動力學、納米藥物靶向研究、受體表達分析及生物成像等多種科研領域。
六、主要應用領域
1. 受體介導的內吞機制研究
追蹤轉鐵蛋白結合受體后進入細胞的過程,研究細胞攝取和轉運動力學;
探索腫瘤細胞及快速增殖細胞中TfR的表達及功能。
2. 細胞攝取及靶向遞送
作為藥物或納米載體表面標記,實現對受體富集細胞的靶向;
評估靶向系統的攝取效率和分布特征。
3. 流式細胞術分析
用于定量檢測細胞表面TfR表達水平及細胞群體分析;
結合其他熒光體實現多參數檢測。
4. 熒光顯微鏡及活體成像
通過熒光成像技術觀察轉鐵蛋白在細胞和組織內的定位;
輔助疾病模型研究,如癌癥、貧血及神經退行性疾病。
七、使用方法及建議
1. 配制與保存
凍干粉用無菌PBS緩沖液復溶,濃度一般為0.1–1 mg/mL;
避光、4°C冷藏保存,避免反復凍融,延長活性和熒光穩定性。
2. 實驗操作
建議實驗濃度根據細胞類型及實驗需求優化,通常使用0.1–20 μg/mL范圍;
染色時間一般為30分鐘至1小時,室溫或4°C孵育;
使用后充分洗滌,減少非特異性結合。
3. 注意事項
避免長時間強光照射,減少熒光淬滅;
標記過程可能對蛋白活性有輕微影響,建議實驗前驗證;
用于流式細胞術時設置合適的陰性對照及補償參數。
八、質量控制指標
檢測項目 標準指標
外觀 綠色透明液體或凍干粉
純度 ≥95%
熒光性能 激發495 nm,發射520 nm,熒光強度穩定
受體結合活性 保持≥90%原轉鐵蛋白受體結合能力
蛋白完整性 SDS-PAGE確認完整單體結構
細胞相容性 細胞存活率≥90%(常用細胞系)
九、包裝規格
規格 包裝形式 儲存條件
0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存
十、常見問題解答
Q1:FITC-轉鐵蛋白的激發和發射波長是多少?
A:激發波長約495 nm,發射波長約520 nm,呈明亮綠色熒光。
Q2:該產品適合用于活細胞實驗嗎?
A:是的,FITC標記的轉鐵蛋白適合活細胞攝取和受體介導內吞研究,但建議先測試細胞毒性。
Q3:如何延長熒光穩定性?
A:避免長時間光照,實驗過程中使用漂白劑,并在避光環境中儲存。
十一、總結
FITC標記轉鐵蛋白作為一種結合了天然蛋白質特異性和熒光追蹤功能的生物試劑,在細胞生物學、藥物靶向輸送及分子成像領域具有重要價值。其保持了轉鐵蛋白與受體的高親和性及優異的熒光性能,使得科研工作者能夠方便地觀察和量化細胞內鐵代謝及受體介導的攝取過程,為疾病機制研究和新型治療方案開發提供堅實工具。
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廠家:西安齊岳生物科技有限公司
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
產地:西安
溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!
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