Concanavalin A-FITC

FITC標記刀豆球蛋白A（ConA-FITC）用于糖鏈識別與細胞膜糖分析

一、產品簡介

Concanavalin A-FITC（ConA-FITC） 是將植物凝集素Concanavalin A（簡稱ConA）與熒光染料FITC（熒光素異硫氰酸酯）共價偶聯制備的熒光標記蛋白。ConA是來源于刀豆（Canavalia ensiformis）的植物凝集素，具有特異性結合α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖殘基的能力，廣泛應用于細胞表面糖類結構的識別、細胞膜糖蛋白標記及生物大分子分析。通過FITC標記后，ConA能在熒光顯微鏡、流式細胞儀等平臺上實現高靈敏度的熒光檢測，助力糖蛋白定位、細胞表面糖鏈研究及細胞活性分析。

二、Concanavalin A（ConA）簡介

來源：從刀豆種子提取得到的四聚體蛋白凝集素；

分子量：約26 kDa（單體），四聚體約104 kDa；

糖結合特異性：特異結合α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖的糖基結構；

生物學功能：

介導細胞間聚集；

識別和結合細胞表面糖蛋白和糖脂；

誘導T細胞激活，作為免疫刺激劑。

三、FITC的標記原理

FITC含有活性的異硫氰酸酯基團（–N=C=S），能與ConA蛋白上的賴氨酸殘基氨基（–NH?）發生共價鍵合；

反應條件溫和，確保ConA的糖結合活性及結構穩定性；

標記后經純化去除游離FITC，獲得高純度的ConA-FITC。

四、產品理化性質

性質 說明

外觀 綠色至黃綠色透明液體或凍干粉末

分子量 四聚體約104 kDa

熒光特性 激發波長約495 nm，發射波長約520 nm（綠色熒光）

溶解性 良好溶于PBS或生理緩沖液

穩定性 常溫穩定，避光保存更佳

標記度（FITC/ConA） 通常1–4 FITC分子/ConA四聚體

五、產品性能特點

1. 高特異性結合

ConA-FITC保持了ConA對α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖殘基的高度特異性，能夠選擇性識別細胞表面及糖蛋白上的糖鏈結構。

2. 強烈穩定的綠色熒光

FITC標記使得ConA具備強烈的綠色熒光信號，便于通過熒光顯微鏡、流式細胞儀等多種檢測平臺進行靈敏檢測。

3. 保持蛋白活性

標記過程溫和，大程度保持了ConA的糖結合能力和蛋白質構象穩定。

4. 適用性廣泛

不僅適用于細胞膜糖蛋白的標記和定位，也適合于生物大分子糖鏈結構分析及免疫學研究。

六、主要應用領域

1. 細胞表面糖蛋白標記和成像

利用ConA-FITC標記細胞表面α-D-葡萄糖/甘露糖殘基，分析細胞表面糖基化狀態；

結合熒光顯微鏡觀察細胞膜糖蛋白分布及動態變化；

應用于腫瘤細胞、免疫細胞及多種細胞類型的表面糖類研究。

2. 流式細胞術

結合流式細胞儀定量檢測細胞表面糖蛋白表達水平；

分析細胞群體中糖鏈分布的異質性。

3. 組織切片免疫熒光

作為糖類特異性探針用于組織樣本中糖蛋白定位；

結合其他免疫標記，實現多重染色。

4. 生物大分子糖鏈分析

研究糖蛋白、糖脂分子中的糖基組成和結構；

用于糖鏈變化在疾病發展中的機制研究。

5. 免疫學及細胞激活研究

研究ConA誘導的T細胞活化過程；

結合熒光信號監測細胞活性變化。

七、實驗使用建議

1. 配制與儲存

溶解：ConA-FITC凍干粉可用PBS緩沖液（pH7.4）復溶，濃度根據實驗需要一般為0.1–1 mg/mL；

儲存：凍干粉-20°C避光保存，復溶液4°C避光短期保存，避免反復凍融。

2. 使用注意事項

避免強光照射，減少熒光漂白；

濃度和孵育時間根據實驗類型優化，常用孵育時間為30分鐘至1小時；

使用前可用適當緩沖液稀釋，保證蛋白穩定性。

3. 免疫熒光染色

細胞或組織固定后，用ConA-FITC染色，溫和孵育；

洗滌去除未結合分子，進行熒光成像。

八、質量控制指標

項目 標準指標

外觀 綠色熒光凍干粉或透明液體

純度 ≥95%

熒光性質 激發495 nm，發射520 nm，信號強烈穩定

糖結合活性 保持≥90%原ConA糖結合能力

分子量 SDS-PAGE確認四聚體結構完整

溶解性 良好，復溶后無沉淀

九、包裝規格

規格 包裝形式 儲存條件

0.5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

1 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

5 mg 凍干粉 –20°C 避光保存

十、常見問題解答

Q1：ConA-FITC的激發和發射波長是多少？

A：激發波長約495 nm，發射波長約520 nm，呈鮮艷綠色熒光。

Q2：使用ConA-FITC標記細胞時需要注意什么？

A：建議控制染色濃度和時間，避免非特異性結合及熒光淬滅，染色后需充分洗滌。

Q3：是否可以用于活細胞染色？

A：ConA-FITC可用于活細胞表面糖蛋白的標記，但應注意濃度和孵育時間以保證細胞活力。

十一、總結

Concanavalin A-FITC作為一款經典的熒光標記植物凝集素，憑借其高特異性糖結合能力和優異的熒光性能，廣泛應用于細胞表面糖蛋白的識別與成像、免疫學研究及生物大分子糖鏈分析。其穩定的熒光信號和良好的生物相容性使其成為生命科學領域中不可或缺的工具試劑。

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廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態：固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

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