【產品名稱】:CY5?V5,V5?CY5 / CY7用于與目標分子的結合和可視化檢測
【基本介紹】:
CY5?V5 / V5?CY5 / CY7
CY5?V5 和 V5?CY5(或替換熒光團為 CY7)的設計通常采用熒光標記肽或蛋白質(例如 V5 標簽),用于與目標分子的結合和可視化檢測。我們提供這個產品,僅供科研,如有需要,歡迎咨詢!
該標記的親和力直接決定結合效率和信號強度,因此優化其親和性至關重要。以下從分子結構、空間構型、標記位置和環境條件四個方面展開詳細分析。我們提供這個產品,僅供科研,如有需要,歡迎咨詢!
首先,從結構設計上考慮,通過在肽鏈兩端引入柔性連接子(linker)可緩解熒光團對肽-配體構象的干擾。例如加入 6-聚乙二醇鏈(PEG6)或甘氨酸-絲氨酸重復序列,能為 CY5 與 V5 標簽提供足夠的空間,使標記不影響目標結合區,提高結合效率。此外,PEG linker 還能改善水溶性和減少非特異性吸附。
其次,優化熒光團與V5標簽的位置至關重要:將熒光團連接在 C 端或 N 端的不同側鏈上可能導致構象差異。例如,如果目標結合區位于肽鏈 N 端,則優選在鏈 C 端接入CY5,通過試驗驗證其結合效率與熒光強度的最佳平衡。建議通過 Site?directed 標記技術對多個候選位點進行篩選和比較。
第三,在熒光團選擇與熒光特性方面,可根據應用背景優選 CY5 或 CY7:CY7 的發射波長更長,穿透能力更強,但熒光量子產率略低。可通過調整染料濃度、封端保護和熒光團分子結構(如 sulfo/Cy 溶液性改造)等優化熒光性能,同時保留肽的結合活性。此外,考慮雜交熒光團系統,如 CY5?CY7 FRET 系統,用于動態監測結合反應,進一步提升結合效率和檢測靈敏度。
環境條件對結合效率也具重要影響,包括 pH、離子強度、溫度和反應時間。在親和力篩選中,一般從 pH 6.5–8.0、NaCl 0–150?mM 條件下比較結合率,優化體系使其保持高穩定性。最好加入少量 Tween?20 或 BSA 等抑制非特異結合,并在室溫或 37?°C 溫度下模擬實際反應環境,選出最優標記方案。
最后,需要配合生物學功能驗證。體外檢測可采用 SPR、微板結合、流式或熒光偏振實驗評估親和常數(Kd)變化;細胞水平上,可進行共聚焦顯微或流式分析,比較 CY5?V5 / V5?CY5 / CY7 標記體在活細胞膜或細胞內部的結合效率。通過循環優化流程:結構設計 → 表征分析 → 功能驗證,可逐步提高親和力和信號質量。
總結:通過結構與連接子優化、標記位點篩選、熒光分子選擇、環境條件調控和系統驗證,能夠顯著提升 CY5?V5 / V5?CY5 / CY7 等標記分子的特異結合效率和成像性能,為生物檢測、活體成像與精密靶向分析提供更可靠的工具和應用基礎。
【基本信息】:
生產地:陜西·西安
純度標準:≥95%(高純級)
物理形態:粉末狀固體
包裝規格:50mg / 100mg / 250mg / 500mg(靈活選量)
貯存要求:低溫避光存儲
特別聲明:本品為科研專用!禁止臨床或人體應用!
【關于我們】:
西安齊岳生物科技有限公司是一家專業從事生物科研材料研發與銷售的高新技術企業,致力于為生命科學、納米材料及化學研究等領域提供全面的產品和解決方案。公司主營產品涵蓋合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、磁性納米顆粒、納米金、近紅外熒光染料、熒光量子點、碳納米管、石墨烯及多種功能高分子材料。憑借完善的質量管理體系、專業的技術支持和靈活的定制服務,公司已與眾多科研院所和高校建立合作關系,持續助力科學研究與技術創新。
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