文獻:原位膜生物素化可實現循環中小細胞外囊泡的直接標記和準確動力學分析
鏈接:https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01176
作者:于自力趙毅范淼吳敏夏厚福陳卓坤劉海明趙以芳陳剛*
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循環小細胞外囊泡 (sEVs) 是天然存在的納米級膜囊泡,可在細胞間傳遞生物活性分子。傳統上,為了評估其在體內的行為,必須將循環 sEVs 從血液中分離出來,然后在體外用成像材料標記,*后注射回動物血液循環中進行后續檢測。繁瑣的分離-標記-回輸程序可能會對循環 sEVs 的自然特性產生不良影響,從而改變其行為和體內檢測的動力學。在此,我們提出了一種原位生物素化策略,通過靜脈注射 DSPE-PEG-生物素直接標記循環 sEVs,旨在更生物友好且準確地評估循環 sEVs 的體內動力學。這種分析策略無需分離-標記-回輸程序,也不會對 sEVs 的自然行為產生不利影響。結果表明,小鼠體內普通循環sEV的壽命約為3天。此外,我們首次揭示了不同細胞來源的循環sEV亞群在體內動力學上的差異,其中紅細胞來源的sEV壽命*長。此外,與原位或自體移植的循環sEV相比,同種異體移植的循環sEV壽命*短。此外,原位生物素化策略也為生物素化的循環sEV的富集提供了一種方法。總之,本研究提供了一種原位標記循環sEV的新策略,有助于準確表征其體內動力學,從而加速其作為生物標志物和診療載體的未來應用。
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