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FITC-Human fibrinogen,F(xiàn)ITC標記人纖維蛋白原用于血栓形成與凝血機制研究
發(fā)布時間:2025-07-18     作者:ssl   分享到:

FITC-Human  fibrinogen

FITC標記人纖維蛋白原用于血栓形成與凝血機制研究

一、產(chǎn)品基本信息

中文名稱:FITC標記人纖維蛋白原

英文名稱:FITC-Human Fibrinogen

別名:FITC-Fibrinogen、熒光標記纖維蛋白原

分子式:蛋白質(zhì),不適用

分子量:約340 kDa(天然三鏈結(jié)構(gòu))

FITC標記度:常見標記度為 2–10 mol FITC/mol 蛋白分子,可定制

激發(fā)/發(fā)射波長:Ex 495 nm / Em 519 nm

外觀:淺黃色至綠色凍干粉末或溶液

純度:≥95%(SDS-PAGE)

級別:科研專用級

儲存條件:-20°C 避光干燥

溶解性:易溶于PBS或Tris緩沖液

二、產(chǎn)品背景與結(jié)構(gòu)簡介

1. 人纖維蛋白原(Human Fibrinogen)

纖維蛋白原是一種高分子量的血漿糖蛋白,由三條多肽鏈(Aα、Bβ和γ)構(gòu)成,兩組對稱結(jié)構(gòu)組合形成分子總量約340 kDa。它是血液凝固過程中關(guān)鍵的前體蛋白之一,能在凝血酶(Thrombin)作用下轉(zhuǎn)化為纖維蛋白(Fibrin),形成血栓網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),封閉創(chuàng)傷面。

在細胞生物學(xué)、血液學(xué)、傷口修復(fù)、血管生成、血栓形成等研究領(lǐng)域中,纖維蛋白原具有廣泛應(yīng)用價值。

2. FITC標記原理

FITC(異硫氰酸熒光素)帶有異硫氰酸基團(–N=C=S),可與蛋白質(zhì)分子上的游離氨基(通常為賴氨酸側(cè)鏈)共價結(jié)合,形成穩(wěn)定的硫脲鍵,從而使蛋白質(zhì)具有綠色熒光,可用于可視化檢測。

三、制備與質(zhì)量控制

1. 合成方法簡述:

纖維蛋白原溶于堿性緩沖液(如0.1 M碳酸氫鈉緩沖液,pH 8.3);

緩慢滴加DMSO中預(yù)先溶解的FITC,常溫避光反應(yīng)2–4小時;

使用Sephadex G-25柱或透析袋去除未反應(yīng)的游離FITC;

對產(chǎn)物進行濃縮、凍干,終得到FITC標記的人纖維蛋白原。

2. 質(zhì)控項目:

檢測項目 方法 合格標準

蛋白純度 SDS-PAGE ≥95%

標記度 495/280比率法 2~10 mol FITC/mol 蛋白

游離FITC含量 HPLC 不可檢出或<5%

生物活性 凝膠實驗 保持部分凝膠功能活性

溶解性 實驗檢測 可溶于PBS(1–10 mg/mL)

FITC-Human  fibrinogen,F(xiàn)ITC標記人纖維蛋白

四、產(chǎn)品應(yīng)用方向

1. 細胞粘附與識別研究

FITC-Fibrinogen 被廣泛用于研究血小板、巨噬細胞、腫瘤細胞等對纖維蛋白原的粘附能力;

適用于檢測細胞表面整合素受體(如 αIIbβ3, αvβ3);

可用于觀察細胞識別粘附機制、免疫突觸形成與細胞化。

2. 血栓形成與凝研究

FITC-Fibrinogen可用于熒光顯微鏡或共聚焦成像追蹤凝血過程;

觀察血小板介導(dǎo)的血栓形成、纖維網(wǎng)生成過程;

用于血管模型中再生/再內(nèi)皮化過程可視化研究。

3. 生物材料與支架功能評價

熒光標記后便于研究人工血管、創(chuàng)傷敷料、納米纖維支架對纖維蛋白原的吸附、釋放與降解行為;

評估生物醫(yī)用材料對血液相容性與止血性能的影響。

4. 腫瘤微環(huán)境中的纖維網(wǎng)絡(luò)研究

腫瘤組織中纖維蛋白原的沉積與遷移能力影響腫瘤細胞侵襲;

FITC標記后有助于成像分析其在腫瘤中的分布和降解;

可結(jié)合基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)活性檢測。

5. 流式細胞術(shù)與激光共聚焦

利用FITC發(fā)射特性可與流式細胞儀配合檢測細胞表面受體與FITC-Fibrinogen結(jié)合程度;

激光共聚焦成像可定位觀察細胞表面聚集、融合、遷移等動態(tài)行為。

五、使用方法與操作建議

1. 溶解方式

使用無菌PBS(pH 7.4)或Tris緩沖液溶解,濃度建議為 1–5 mg/mL;

如為粉末產(chǎn)品,溶解后建議分裝儲存,避免反復(fù)凍融。

2. 使用濃度建議

實驗類型 建議濃度

細胞粘附實驗 10–100 μg/mL

流式細胞術(shù) 1–10 μg/mL

成像類實驗(共聚焦) 20–50 μg/mL

血栓模型注射實驗 50–200 μg/只

六、儲存條件與穩(wěn)定性

狀態(tài) 儲存條件 有效期

凍干粉末 -20°C 干燥避光 12個月

溶液狀態(tài) 4°C 避光,不含防腐劑 1–2周

溶液狀態(tài)(含NaN?) 4°C 可保存4周以上 推薦分裝使用

注意事項:

避光操作,防止FITC熒光衰減;

避免與重金屬離子(如Fe3?、Cu2?)共存,避免氧化損傷;

溶解液建議過濾除菌后使用。

七、常見問題解答(FAQ)

Q1:FITC-Fibrinogen 是否保留凝血活性?

A:部分保留,F(xiàn)ITC標記可能輕微影響蛋白三維構(gòu)象及其與凝血酶的作用。用于標記和細胞實驗完全適用;如對活性要求較高,請選用低標記度版本或活性驗證版。

Q2:可否用于動物實驗?

A:本產(chǎn)品為科研級原料,可用于小鼠、兔等模型的熒光示蹤、血栓成像等實驗(需自行評估免疫源性風(fēng)險)。

Q3:是否可以與其他標記物聯(lián)合使用?

A:可以,F(xiàn)ITC通道可與DAPI、Cy5、PE等熒光染料組合進行多重染色和成像,需注意激發(fā)濾光片匹配。

Q4:能否定制更高或更低標記度?

A:支持標記度定制服務(wù),范圍從1–15 FITC/蛋白分子均可提供,滿足不同靈敏度或活性需求。

八、產(chǎn)品規(guī)格與訂購信息

包裝規(guī)格 編號示例 應(yīng)用建議

0.5 mg FIB-FITC-0.5 初步方法開發(fā)

1 mg FIB-FITC-1 常規(guī)實驗用量

5 mg FIB-FITC-5 中等規(guī)模實驗

≥10 mg 定制服務(wù) 動物試驗/材料涂層

九、總結(jié)

FITC-Human Fibrinogen 是一款兼具天然纖維蛋白原功能與熒光可視化能力的多功能標記蛋白。適用于細胞粘附、血栓成像、生物材料相容性評價、免疫信號分析及疾病模型機制研究等領(lǐng)域。

其良好的熒光強度、溶解性和穩(wěn)定性,使其成為研究血液-生物界面、止血系統(tǒng)功能以及細胞-外基質(zhì)相互作用的重要工具之一。

西安齊岳生物專業(yè)提供各類熒光標記產(chǎn)品及定制服務(wù),覆蓋小分子藥物、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料,滿足科研和產(chǎn)業(yè)在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領(lǐng)域的需求。

西安齊岳生物確保標記分子高效、穩(wěn)定且保留生物活性。我們支持個性化定制,靈活設(shè)計標記方案,快速響應(yīng)客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態(tài):固體/粉末/溶液

產(chǎn)地:西安

溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!

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