產品名稱:Cy5.5-PEG-MAL,熒光Cy5.5-聚乙二醇-馬來酰亞胺的反應條件優化
使用注意事項:確保實驗成功與安全的關鍵
反應條件優化:
MAL與巰基的反應需在無氧環境(如氮氣保護)下進行,避免MAL氧化失活(生成馬來酰胺酸)。
反應pH建議控制在6.5-7.5,過高或過低會降低反應速率或導致Cy5.5降解。
儲存與穩定性:
Cy5.5-PEG-MAL 通常以干粉形式儲存于-20℃(避光),溶解后需分裝保存,避免反復凍融導致PEG鏈斷裂或Cy5.5光漂白。
溶解溶劑建議為DMSO或DMF(有機相),使用時需用PBS或緩沖液稀釋至工作濃度(通常為1-10 μM)。
生物安全性評估:
盡管PEG可降低免疫原性,但部分個體可能對PEG過敏(如注射用藥物中需檢測抗PEG抗體)。
Cy5.5的細胞毒性較低,但高濃度(>100 μM)可能影響細胞活性,需通過MTT或CCK-8實驗驗證工作濃度。
對照實驗設計:
需設置未標記組(僅Cy5.5-PEG-MAL)和游離抗體組(無MAL修飾),以排除非特異性結合或熒光背景干擾。
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