結構功能與化學特性
1. 熒光素部分(Fluorescein/FITC)
熒光素是一種綠色熒光染料,具有以下優點:
吸收峰 ~490 nm,發射峰 ~520 nm;
在生物體內穩定,可在 pH 6–8 范圍內維持高量子產率;
與光學成像系統高度兼容;
結構上的羧酸和異硫氰酸基便于偶聯到胺類目標分子。
2. DBCO 部分(Dibenzocyclooctyne)
DBCO 是一種具強環張力的炔類化合物,能快速參與應變促成的銅離子無催化點擊反應(SPAAC),即:
DBCO + Azide → Triazole(無需金屬離子催化)
該反應的特點是:
快速、高效、特異性高;
在生理條件下無需金屬催化劑,對活細胞和生物體友好;
廣泛用于細胞表面修飾、標記生物分子等。
應用領域
FITC-DBCO 屬于功能性熒光探針,在生命科學研究中有諸多用途,特別適用于:
1. 生物正交標記(Bioorthogonal Labeling)
可與含有疊氮基團(–N?)的分子進行選擇性標記;
被廣泛用于:
多糖、糖類探針(如azido-sugar)標記;
蛋白質生物正交修飾;
細胞膜表面成像;
納米粒或抗體的功能化。
2. 活細胞成像
熒光素部分賦予其強的熒光成像能力;
因DBCO與疊氮反應無需金屬催化,特別適合活細胞環境下進行標記;
可進行實時、動態地觀測目標生物分子的定位與轉運。
3. 熒光示蹤與追蹤
可用于藥物、DNA、RNA、脂質體等攜帶系統的熒光標記;
監測其在細胞或體內的輸運、分布和清除過程;
也常用于評估納米載體靶向性或細胞攝取能力。
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