產(chǎn)品名稱:ENDO BCN-O-PNB,內(nèi)型雙環(huán)[6.1.0]壬-4-炔-對(duì)硝基芐基的合成方法
合成方法
ENDO BCN-O-PNB 的制備
步驟:
ENDO BCN活化:
將 ENDO BCN-OH 與 對(duì)硝基苯氯甲酸酯(PNP-Cl) 在干燥 THF 中反應(yīng),生成 ENDO BCN-PNP(活性碳酸酯)。
PNB基團(tuán)引入:
將 ENDO BCN-PNP 與 對(duì)硝基芐醇(PNB-OH) 在 pH 9.0 的碳酸鹽緩沖液中反應(yīng),形成 ENDO BCN-O-PNB。
純化:
通過硅膠柱層析(洗脫劑:乙酸乙酯/己烷)或制備型 HPLC 去除未反應(yīng)原料。
脫保護(hù)與SPAAC功能化
光解觸發(fā):
將 ENDO BCN-O-PNB 溶液置于254 nm或365 nm紫外光下照射10-30分鐘,通過TLC或HPLC監(jiān)測(cè)PNB基團(tuán)裂解。
酸解觸發(fā):
將 ENDO BCN-O-PNB 溶解于pH 2-4的酸性緩沖液(如HCl/甲醇),室溫?cái)嚢?-2小時(shí),通過質(zhì)譜(MS)確認(rèn)ENDO BCN釋放。
SPAAC反應(yīng):
將釋放的ENDO BCN與 疊氮修飾的功能分子(如Cy5-N?或Dox-N?)在生理?xiàng)l件下反應(yīng),生成目標(biāo)復(fù)合物。
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