產品名稱:C16-PEG-BIOTIN/N3/COOH/DBCO的合成方法
合成方法
C16-PEG-BIOTIN的制備核心是將C16、PEG與生物素通過化學鍵連接,常用方法包括:
1. 逐步偶聯法
步驟:
C16-PEG合成:將十六烷酸(C16)與PEG通過酯化或酰胺化反應連接。
酯化反應:C16與PEG-COOH在EDC/NHS催化下反應,生成C16-PEG-COO-。
酰胺化反應:C16-NH?與PEG-COOH在EDC/NHS催化下反應,生成C16-PEG-NH-。
生物素偶聯:將C16-PEG與生物素-NHS酯在PBS(pH 7.4)中反應,生成C16-PEG-BIOTIN。
純化:通過透析(截留分子量:3000 Da)或凝膠滲透色譜(GPC)去除未反應原料。
優勢:反應條件溫和,產物純度高(>95%)。
2. 點擊化學法(SPAAC)
原理:若PEG預先修飾疊氮基(PEG-N?),可通過無銅點擊反應(SPAAC)與二苯并環辛炔(DBCO)修飾的C16(C16-DBCO)及生物素(Biotin-DBCO)連接。
步驟:
C16-DBCO合成:通過酰胺化反應將DBCO連接到C16。
Biotin-DBCO合成:通過酰胺化反應將DBCO連接到生物素。
點擊反應:在PBS(pH 7.4)中,C16-DBCO、PEG-N?與Biotin-DBCO反應,生成C16-PEG-BIOTIN。
優勢:反應快速(30分鐘內完成),無需催化劑,結合效率高(>90%)。
3. 固相合成法
原理:利用固相載體(如樹脂)逐步連接C16、PEG與生物素,適用于大規模生產。
步驟:
樹脂活化:將C16通過酯鍵或酰胺鍵固定于樹脂表面。
PEG延伸:通過重復的偶聯-去保護步驟延長PEG鏈。
生物素偶聯:將生物素-NHS酯連接到PEG末端。
切割與純化:用TFA(三氟乙酸)切割產物,通過HPLC純化。
優勢:產率高(>80%),適合工業化生產。
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