文獻：脂質錨定紅細胞表面改性：結構-活性關系以實現*佳膜結合、體內保留和免疫相容性

鏈接：https://advanced.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/anbr.202200037

作者：漢曼特·蓋克瓦德， 王冠奎， 李悅， 大衛·伯恩， 德米特里·辛伯格

節選：

脂質庫設計及其在紅細胞膜中的摻入效率

研究中使用的脂質衍生物如圖 1所示。我們獲得了市售的二烷基吲哚羰菁脂質 DiI-C18、DiI-C18:2、DiI-C16、DiI-C12，并合成了其他 DiI-C18 頭部基團衍生物：DiI-胺、DiI-PEG5000 和 DiI-PEG3400-甲基四嗪 (Mtz)。此外，我們還制備了 Cy3 的二酰基甘油衍生物：Cy3-C18、Cy3-C18:1、Cy3-C16、Cy3-C14、Cy3-C12、磷脂衍生物 Cy3-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 (Cy3-DSPE) 和 Cy3-膽固醇。該庫涵蓋不同的脂質長度、脂質類型以及頭部基團-尾部連接。此外，該庫還包含有限數量的與藥物遞送相關的頭部基團衍生物。因此，PEG化脂質對于紅細胞PEG化用于血液偽裝具有重要意義。Mtz 是一個點擊化學基團，能夠用生物分子進行多種修飾，[ 13 ]但也可作為小分子有效載荷的模擬物（M w 230 Da）。為了確定標記效率，我們使用了來自兩名健康捐贈者的新鮮人紅細胞。將紅細胞與 25 μM 的脂質一起孵育 1 小時，然后清洗并用流式細胞術分析標記細胞的百分比和平均熒光強度（MFI）。短鏈 DiI-C12 和 Cy3 二酰基甘油（C12、C14）和長鏈 DiI-PEG5000、DiI-PEG3400Mtz、DiI-C18:2 和 Cy3-DSPE 導致標記人紅細胞的百分比*高（圖2 A）。 DiI-C12、DiI-C16、DiI-C18、Cy3-DSPE 和 DiI-C18-PEG3400Mtz 的 MFI 比其他脂質高 2-3 倍（圖 2B ）。有趣的是，氨基 DiI-C18 的標記效率比母體 DiI-C18 低約 4 倍。然后使用選定的脂質標記小鼠紅細胞。圖2C、D中的數據 顯示小鼠紅細胞標記效率（MFI 和紅細胞百分比）通常高于人類紅細胞。小鼠和人類紅細胞標記效率之間沒有相關性，但 DiI-C12 除外，它在兩種類型的紅細胞中均表現出*高的效率（圖 2E）。*后，我們檢查了 Cy3 基團信號摻入紅細胞時的線性。DiI-PEG3400Mtz 顯示小鼠紅細胞 MFI 隨著標記濃度的增加而線性增加（圖 2F）。  

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