Cyanine5-LPS,Cyanine5熒光染料標(biāo)記脂多糖LPS的合成及純化過(guò)程
Cyanine5-LPS 是一種將近紅外熒光染料 Cyanine5(Cy5)與脂多糖(LPS, Lipopolysaccharide)共價(jià)連接形成的生物探針,適用于研究免疫激活、細(xì)菌識(shí)別、細(xì)胞成像與炎癥路徑分析。LPS 是革蘭氏陰性菌外膜的重要組分,能與巨噬細(xì)胞表面的 TLR4(Toll-like receptor 4)結(jié)合并誘導(dǎo)免疫反應(yīng)。將其標(biāo)記上熒光染料有助于在分子層面可視化其生物分布與受體相互作用。
合成過(guò)程 通常利用 LPS 分子中的羧基或醛基與 Cyanine5-NH? 或 Cy5-NHS 酯進(jìn)行反應(yīng):
將LPS溶解于水或PBS緩沖液中,使用EDC/NHS活化LPS上的羧酸基團(tuán),生成活性酯中間體;
隨后加入溶于DMSO中的 Cy5-NH?,使其在pH 6.5–7.5 條件下緩慢反應(yīng),通常在4°C避光搖床中反應(yīng)12–24小時(shí);
另一種策略是將Cy5-NHS酯直接添加至LPS溶液中,利用其表面胺基共價(jià)連接,形成穩(wěn)定酰胺鍵。
純化過(guò)程 需徹底去除未結(jié)合的自由染料。一般采用以下方法:
透析(3.5 kDa–10 kDa MWCO膜),在PBS中進(jìn)行48小時(shí)以上換液;
或采用 凝膠滲透色譜(如 Sephadex G-25),以分離大分子LPS標(biāo)記物與游離染料;
使用 紫外-可見(jiàn)分光光度法 檢測(cè)純化效果(λmax ≈ 650 nm),確保無(wú)游離染料干擾。
終產(chǎn)物 Cy5-LPS 可通過(guò)質(zhì)譜(MALDI-TOF)和凝膠電泳確認(rèn)標(biāo)記程度,并用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)或體內(nèi)追蹤研究,具有高靈敏度和良好的可視化性能。
產(chǎn)品名稱:Cyanine5-LPS,Cyanine5熒光染料標(biāo)記脂多糖
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。
儲(chǔ)藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齊岳生物供應(yīng)近紅外熒光花菁染料標(biāo)記各種官能團(tuán)的定制服務(wù),如活性酯(NHS酯)、馬來(lái)酰亞胺(MAL)、疊氮(N?)、炔基(alkyne)等,便于與蛋白質(zhì)、肽、多糖、抗體、寡核苷酸、納米顆粒等共價(jià)偶聯(lián)。
推薦產(chǎn)品:
174961-75-2
Tyramide-Cy3
氰基-3-酪酰胺
Sulfo-Cyanine3 Tyramide
Sulfo-Cy3Tyramide
磺酸基-花青素Cy3酪酰胺
雙功能螯合劑FAPI
CAS:2471983-20-5
CAS:756525-94-7
mPEG-NHS
僅供科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)AXC.2025.06.23