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DSPE-FITC修飾脂質體的制備與熒光示蹤能力評估
發布時間:2025-07-04     作者:kx   分享到:

文獻:靶向肽、熒光試劑修飾雷帕霉素磁性脂質體靶向早期動脈粥樣硬化斑塊及*

鏈接:https://www.mdpi.com/1999-4923/14/5/1083

作者:陳黃,黃文濤,奧西德,張麗芬,張春雨,周承前,魏偉,李永生,泉州,陳文麗,奧西德和唐玉寬

節選:

脂質體的合成

藥品信息

DSPE-MPEG 2000(N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺)、DSPE-PEG 2000(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-聚乙二醇)-NHS、DSPE-異硫氰酸熒光素(DSPE-FITC)均由西安瑞熙生物科技有限公司(中國西安)提供。二甲基甲酰胺(DMF)和N-甲基嗎啉購自Sigma-Aldrich公司(美國密蘇里州圣路易斯)。肽VHPKQHR(VHP)購自上海桃浦生物科技有限公司(中國上海)。

Rap/ Fe3O4 @ Lipo的 合成

將 90 mg 牛血清白蛋白 (BSA) 加入 USPIO 溶液[ 29 ] (10 mg USPIO, 10 mL 超純水) 中, 冰浴下劇烈攪拌活化 6 h。將所得 USPIO-BSA 溶液 (1 mg/mL) 儲存在 4°C 下用于后續實驗。本研究中使用的脂質體是通過薄膜水化法制備的。稱取 2 mg 雷帕霉素 (上海必德醫藥科技有限公司, 中國上海)、10 mg 蛋黃卵磷脂、5 mg DSPE-MPEG 2000和 1 mg DSPE-FITC 將其溶于 5 mL 甲醇和氯仿 (Sigma-Aldrich, 美國密蘇里州圣路易斯) 混合溶劑 (1:1, v / v ) 中。37°C 減壓旋轉蒸發除去溶劑, 加入 2 mL USPIO-BSA 進行水化;將所得水溶液超聲分散,得到脂質體溶液,*后經超濾離心管(300 kDa)(Corning Incorporated, Corning, NY, USA)以6000 rpm離心15 min,除去溶液,再分散于2 mL純水中,即得1 mg/mL雷帕霉素/Fe3O4 @脂質體(非靶向脂質體,Rap/ Fe3O4 @ Lipo,R/F@L) 。

DSPE-PEG 2000 -VHP 的合成

將200 mg DSPE-PEG 2000 -NHS溶于5 mL DMF中,然后加入220 mg VHP和220 mg N-甲基嗎啉,室溫攪拌12 h至均相。將反應液置于透析袋(截留分子量(MWCO)= 3500)中,在純水中透析24 h。收集透析液,冷凍干燥,即得DSPE-PEG 2000 -VHP。

Rap/ Fe3O4 @VHP-Lipo的 合成

將2 mg 雷帕霉素、10 mg 蛋黃卵磷脂、5 mg DSPE-MPEG 2000、1 mg DSPE-PEG 2000 -VHP 和 1 mg DSPE-FITC 溶于甲醇和氯仿混合溶劑(1:1,v / v)中,37 ℃減壓旋轉蒸發除去溶劑,加入2 mL USPIO-BSA 水合,所得水溶液經超聲波分散,得到脂質體溶液。*后經超濾離心管(300 kDa)以6000 rpm離心15 min,除去溶液,重新分散于2 mL純水中,即得1 mg/mL雷帕霉素/Fe3O4 @ VHPKQHR-脂質體(靶向脂質體,Rap/ Fe3O4 @ VHP-Lipo,R/F@VL )。

DSPE-FITC

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