產品名稱:叔丁基保護氨基PEG羥基,Boc-NH-PEG-OH的實驗方案
關鍵應用場景與實驗方案
1. 多步合成:氨基的選擇性功能化
應用場景:
在復雜分子(如蛋白質、多肽、核酸)的PEG化修飾中,需先保護氨基以避免副反應,后續脫保護后引入目標基團。
實驗步驟:
Boc脫保護:
將Boc-NH-PEG-OH溶于TFA(10% v/v in DCM),室溫攪拌1小時。
旋轉蒸發去除TFA,殘留物用甲苯共沸干燥,得到NH?-PEG-OH。
氨基偶聯:
將NH?-PEG-OH與NHS酯活化分子(如NHS-PEG-COOH)在pH 8.0的PBS中反應,生成NH?-PEG-NH-CO-PEG-COOH。
羥基活化:
剩余羥基可轉化為活性酯(如NHS酯)或炔烴,用于后續點擊化學標記。
2. 生物分子修飾:蛋白質PEG化
應用場景:
延長蛋白質體內半衰期,減少免疫原性,同時保留生物活性。
實驗步驟:
Boc脫保護:
同上,得到NH?-PEG-OH。
羥基活化:
將NH?-PEG-OH與NHS、DCC在DMF中反應,生成NH?-PEG-O-CO-NHS(活性酯)。
蛋白質偶聯:
將活性酯與羧酸化蛋白(如BSA-COOH)在pH 8.0的PBS中反應,生成BSA-PEG-NH?。
純化與表征:
通過超濾或透析去除未反應試劑,通過SDS-PAGE和質譜驗證偶聯效率。
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