GDP-L-fucose-CY5，CY5標記GDP-L-巖藻糖的合成過程研究

GDP-L-fucose-CY5 是將活性糖基化底物 GDP-L-巖藻糖（Guanosine diphosphate-L-fucose）與近紅外熒光染料 CY5 共價連接形成的熒光核苷酸糖探針，應(yīng)用于糖基轉(zhuǎn)移酶底物篩選、糖生物合成研究和細胞糖基化動態(tài)成像等領(lǐng)域。該探針結(jié)構(gòu)特點在于保留了 L-fucose 的糖基結(jié)構(gòu)及 GDP 的識別功能，同時通過 CY5 實現(xiàn)熒光追蹤能力。

合成過程主要包括以下步驟：

功能位點選擇與設(shè)計

GDP-L-fucose 分子含有多個羥基，合成中避免破壞糖苷鍵和磷酸基團活性。常選擇在 GDP 的 2' 或 3'-OH 或 fucose 的羥基通過點擊化學進行間接修飾。一般使用 L-fucose 衍生物（如 amino-fucose）與 CY5-NHS 或 CY5-alkyne 實現(xiàn)標記。

引入功能連接臂

使用帶有疊氮基（azide）的修飾 GDP-L-fucose（例如 azido-propyl-GDP-fucose）作為前體，與含炔基的 CY5（如 CY5-alkyne）進行 CuAAC（銅催化疊氮-炔環(huán)加成）點擊反應(yīng)。此反應(yīng)具有高選擇性和溫和條件，是實現(xiàn)糖探針構(gòu)建的主流方式。

點擊反應(yīng)條件

反應(yīng)體系：GDP-L-fucose-N? + CY5-alkyne + CuSO? + sodium ascorbate；

溶劑體系：DMSO/H?O 或 Tris 緩沖液；

反應(yīng)時間：室溫或37°C，避光反應(yīng)4~16小時。

純化過程

由于產(chǎn)物極性強，常采用陰離子交換色譜（DEAE柱）或反相HPLC進行分離，收集特定熒光峰。純化后可透析去除銅離子殘留，得到穩(wěn)定、可儲存的水溶性產(chǎn)物。

產(chǎn)品名稱：GDP-L-fucose-CY5

純度：95%+

性狀：基于不同的分子量，呈白色 / 類白色固體，或液體。

溶劑：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機溶劑。

儲藏條件：-20°C干燥避光保存

包裝規(guī)格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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僅供科研，不能用于人體實驗AXC.2025.05.23