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CY3.5-Ovalbumin,熒光標記卵清蛋白用于抗原呈遞機制的可視化研究
發(fā)布時間:2025-06-16     作者:ssl   分享到:

CY3.5-Ovalbumin

CY3.5-Ovalbumin用于抗原呈遞機制的可視化研究

CY3.5-Ovalbumin 產品信息介紹

一、產品概述

CY3.5-Ovalbumin 是將熒光染料 CY3.5 通過共價方式標記在卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)分子上制備而成的一種高效熒光示蹤分子。卵清蛋白是從雞蛋蛋清中提取的一種高純度蛋白質,常用于免疫學、抗原遞呈、T細胞激活以及胞內轉運等機制研究。通過與 CY3.5 熒光染料結合,該產品不僅保留了卵清蛋白的天然抗原性,還具備鮮明的紅橙色熒光特性,非常適合用于細胞攝取成像、DC細胞抗原遞呈實驗、跨膜轉運追蹤及納米載體功能驗證等領域。

CY3.5 是一種中紅光熒光染料,具有高熒光強度和良好的光穩(wěn)定性,其發(fā)射波長位于 596 nm 左右,避免了與常用的 FITC、DAPI 等染料的激發(fā)發(fā)射光譜重疊,在多色共聚焦成像中具有極大的優(yōu)勢。

 

二、產品組成與結構特點

1. 卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)

卵清蛋白是雞蛋蛋清中主要的蛋白質,分子量約為 45 kDa,約含 385 個氨基酸殘基。其優(yōu)點包括:

高純度、穩(wěn)定性好;

免疫原性強,廣泛用于抗原遞呈研究;

細胞攝取效率高,適合DC樹突狀細胞等的內吞研究;

與T細胞識別系統(如OT-I/OT-II)配套使用廣泛。

2. CY3.5 熒光染料

CY3.5 是 Cyanine 系列熒光染料的一員,具有以下優(yōu)勢:

激發(fā)波長(Ex):~581 nm

發(fā)射波長(Em):~596 nm

熒光強度高,抗光漂白性強

不易自聚,背景信號低

適合激光共聚焦、熒光顯微、活體成像及流式細胞術

通過 NHS 活性酯將 CY3.5 共價接枝到 OVA 分子中的賴氨酸殘基上,形成穩(wěn)定的酰胺鍵連接,既保持了蛋白的結構功能,又確保了熒光的穩(wěn)定輸出。

 CY3.5-Ovalbumin,熒光標記卵清蛋白

三、產品特性與優(yōu)勢

特性 優(yōu)勢說明

熒光穩(wěn)定 CY3.5 發(fā)光效率高,光漂白慢,適合長期成像實驗

抗原性保留 OVA 結構保持完整,適合抗原遞呈、免疫反應研究

標記均一 控制染料/蛋白比(D/P)在合理范圍(一般為 3–10),避免過度修飾影響功能

生物相容性強 適用于細胞實驗與體內成像研究

多平臺適用 可用于流式細胞儀、激光共聚焦、活體熒光成像、小動物示蹤

 

四、應用方向與實驗用途

1. 抗原遞呈研究

CY3.5-OVA 是經典的模型抗原,用于研究 MHC I 與 MHC II 通路中的抗原處理與遞呈機制,特別適合 DC 樹突狀細胞內吞后的熒光成像。

2. T細胞活化研究

可與 OT-I(識別OVA257–264)或 OT-II(識別OVA323–339)轉基因小鼠T細胞配合使用,用于體內免疫應答機制探究。

3. 納米載體遞送驗證

CY3.5-OVA 可作為蛋白類模型藥物負載到多種納米系統中,如脂質體、聚合物微球等,驗證其載藥能力、釋放行為與靶向性。

4. 細胞攝取與胞內定位

在 RAW264.7、DC2.4、THP-1 等免疫相關細胞系中,可用作攝取能力評估、內體-溶酶體共定位實驗。

5. 跨膜轉運路徑分析

通過細胞熒光追蹤,可研究胞吞、胞吐、胞內運輸等機制,尤其適合配合 LysoTracker、EndoTracker、DAPI 等染料共染觀察。

 

五、技術參數信息

項目 參數說明

產品名稱 CY3.5-Ovalbumin

蛋白來源 雞卵清蛋白(≥98%純度)

熒光染料 CY3.5(Cyanine類)

激發(fā)波長(Ex) ~581 nm

發(fā)射波長(Em) ~596 nm

熒光顏色 橙紅色

標記度(Dye/Protein) 3–10(可按需定制)

分子量 ~45 kDa(蛋白本體)

外觀 紅橙色凍干粉或透明溶液

儲存條件 -20℃避光保存

保質期 凍干1年,溶液6個月(避免反復凍融)

 

六、推薦使用方法

細胞實驗(如DC細胞)

溶解樣品:推薦用PBS或細胞培養(yǎng)基緩慢溶解凍干粉。

濃度選擇:10–50 μg/mL 范圍內設定濃度梯度。

共染實驗:可與DAPI、LysoTracker等配合進行多通道觀察。

孵育時間:一般為0.5–4小時,根據實驗目的優(yōu)化。

體內實驗

小動物注射劑量:推薦0.5–2 mg/kg。

成像設備匹配:確保激發(fā)光源涵蓋581 nm波段,并設置合適Em通道。

檢測窗口期:注射后1–8小時內信號穩(wěn)定,適合動態(tài)追蹤。

 

七、注意事項

實驗過程中需全程避光操作;

建議現配現用,避免反復凍融;

若為細胞實驗,注意終濃度避免細胞毒性;

染料標記后的蛋白略有分子量變化,影響電泳遷移率屬正常現象;

如需特定pH緩沖、包埋納米系統或接枝靶向肽段,支持定制服務。

 

八、產品拓展與定制

CY3.5-Ovalbumin 還可作為功能模塊用于以下拓展方向:

生物偶聯平臺構建:與納米粒子、磁珠、量子點等結合;

靶向系統開發(fā):可接枝PEG、靶向肽、抗體等;

多染料共標記體系設計:如與FITC-BSA、Cy5-Transferrin、TRITC-ConA等構建多色追蹤系統;

動物疫苗遞送研究模型:作為模型抗原負載于疫苗載體中,觀察免疫效應。

 

九、總結

CY3.5-Ovalbumin 是一款功能強大、穩(wěn)定可靠的熒光蛋白探針,兼具優(yōu)異的免疫活性和出色的熒光性能。其在抗原遞呈、免疫調控、納米載體驗證、胞內機制研究等多個領域均展現出良好的適用性與實用價值。對于開展免疫學、藥物遞送、生物材料研究的科研人員而言,CY3.5-Ovalbumin 是一個不可多得的高性能工具分子。

 

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用途:科研

狀態(tài):固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研,不能用于人體實驗!

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