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FITC-ConA,熒光素-刀豆球蛋白A的反應機制
發布時間:2025-06-16     作者:axc   分享到:

FITC-ConA,熒光素-刀豆球蛋白A的反應機制

FITC(熒光素異硫氰酸酯)與刀豆球蛋白 A(ConA)的偶聯基于化學共價標記反應。ConA 是從刀豆(Canavalia ensiformis)中提取的植物凝集素,含有 4 個亞基,每個亞基含 1 個糖結合位點,其活性依賴于 Ca2?和 Mg2?的存在。FITC 的異硫氰酸酯基團(-N=C=S)在堿性條件下(pH 8.0-9.0)可與 ConA 中賴氨酸殘基的 ε- 氨基(-NH?)發生親核加成反應,形成穩定的硫脲鍵(-N-C-S-),從而將熒光素共價連接到 ConA 分子上,生成 FITC-ConA 偶聯物。該標記過程不破壞 ConA 的糖結合活性,但可能影響其寡聚化狀態(ConA 在溶液中可形成四聚體)。

二、糖結合反應機制

特異性糖識別

ConA 的糖結合位點對α- 甘露糖(α-Man)、α- 葡萄糖(α-Glc)和 α- 果糖(α-Fru) 具有高度特異性,尤其偏好末端帶有這些糖殘基的糖鏈(如糖蛋白、糖脂或多糖)。其結合機制依賴于:

氫鍵與疏水作用:ConA 的氨基酸殘基(如 Arg、Asp、Glu)與糖分子的羥基形成氫鍵,同時糖環的疏水部分與 ConA 的疏水口袋結合。

金屬離子輔助:Ca2?和 Mg2?通過配位作用穩定糖分子與 ConA 的結合構象,缺失金屬離子會顯著降低結合親和力。

細胞表面糖鏈的結合模式

在生物樣本中(如細胞、組織切片),FITC-ConA 可與細胞膜表面糖蛋白(如整合素、受體蛋白)或糖脂上的 α- 甘露糖 / 葡萄糖殘基結合。例如,免疫細胞表面的甘露糖受體、腫瘤細胞異常表達的糖鏈等,均可成為 FITC-ConA 的靶點。結合后,熒光素在 488 nm 激發光下發射綠色熒光(峰值約 520 nm),通過熒光顯微鏡或流式細胞術可直觀觀察其分布。

產品名稱:FITC-ConA,熒光素-刀豆球蛋白A

純度:95%+

性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。

溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規有機溶劑。

儲藏條件:-20°C干燥避光保存

包裝規格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

FITC-ConA

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