CY5-Sericin,CY5-絲膠蛋白的合成及純化過程
CY5-Sericin 是以近紅外熒光染料 CY5 標(biāo)記絲膠蛋白(Sericin)得到的熒光生物材料,用于藥物遞送、細(xì)胞示蹤、組織工程支架成像等。絲膠蛋白是蠶絲蛋白中的親水成分,分子量分布廣(20–400 kDa),富含羧基與氨基等活性基團(tuán),具良好的生物相容性與成膜性。
CY5 標(biāo)記的過程以 CY5-NHS 酯為反應(yīng)物,專一性地與 Sericin 分子中的伯胺基(來自賴氨酸)發(fā)生親核反應(yīng)形成酰胺鍵。
合成步驟:
絲膠蛋白溶液準(zhǔn)備:將脫膠后的絲膠蛋白溶于 pH 8.5 的碳酸鹽緩沖液,濃度一般控制在1–5 mg/mL,并進(jìn)行濾膜除雜。
CY5-NHS 溶液制備:染料以 DMSO 或 DMF 溶解,并避光處理;控制加樣比例為 CY5-NHS : Sericin(按氨基數(shù)估算)≈ 3 : 1,以避免過度標(biāo)記。
偶聯(lián)反應(yīng):在室溫避光條件下反應(yīng)2小時,充分?jǐn)嚢瑁_保染料均勻分布。
純化步驟:利用透析(MWCO 3–10 kDa)去除游離染料,或通過 Sephadex G-50 層析完成大分子與小分子的分離;在低溫、避光條件下操作,以防止熒光團(tuán)降解。
純度與標(biāo)記度分析:使用 UV-Vis 測定 280 nm(蛋白)與 646 nm(CY5)雙吸收峰,計算 CY5/Sericin 的摩爾標(biāo)記比;同時通過 SDS-PAGE、質(zhì)譜或 SEC-HPLC 分析蛋白純度及標(biāo)記后均一性。
產(chǎn)品名稱:CY5-Sericin,CY5-絲膠蛋白
純度:95%+
性狀:基于不同的分子量,呈白色 / 類白色固體,或液體。
溶劑:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常規(guī)有機(jī)溶劑。
儲藏條件:-20°C干燥避光保存
包裝規(guī)格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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