CY3-標記ConA作為糖鏈識別探針的構建與應用

ConA-CY3

產品名稱：CY3標記刀豆蛋白A

英文名稱：Concanavalin A–Cy3（ConA-CY3）

CAS號：11028-71-0（未標記ConA）

分子量：約104 kDa（四聚體）

熒光特性：激發波長 550 nm，發射波長 570 nm（Cy3）

形式：凍干粉末或液體（PBS溶液）

保存條件：-20°C避光儲存

純度：≥95%（SDS-PAGE）

用途：糖類識別、糖蛋白成像、細胞膜糖鏈研究、熒光成像、流式細胞術等

一、產品簡介

ConA-CY3 是一種以刀豆蛋白A（Concanavalin A）為基礎，通過共價結合熒光染料Cy3（Cyanine 3）而制得的熒光標記凝集素。ConA 是從刀豆（Canavalia ensiformis）中提取的植物凝集素，能特異性地識別 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖殘基，廣泛用于糖類識別、糖蛋白檢測、細胞膜糖鏈成像等研究。

CY3 是一種性能優異的橙紅色熒光染料，具有高量子產率、良好的光穩定性和適中的水溶性。在 ConA 上標記 Cy3，可實現對糖類結構的熒光可視化，尤其適用于共聚焦顯微鏡、流式細胞術、熒光染色與定量分析等實驗。

二、ConA-CY3 的結構與標記方式

ConA 是一種金屬依賴型四聚體蛋白，天然狀態下分子量約為104 kDa。每個單體約26 kDa，能識別糖鏈中的非還原末端甘露糖和葡萄糖。其結合活性依賴于 Ca2? 和 Mn2? 的存在。

Cy3染料通常以NHS酯形式與ConA蛋白表面賴氨酸殘基共價偶聯。我們優化了反應條件，確保Cy3標記度處于1~3 mol Cy3/mol ConA之間，在保留糖結合活性的同時提供強烈且穩定的熒光信號。

三、產品特點

高特異性識別能力：ConA-CY3可高效識別糖蛋白或細胞表面的α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖結構。

強熒光信號：Cy3熒光亮度高，適用于激光共聚焦、TIRF、流式細胞術和活體成像。

低背景、高靈敏度：去除游離Cy3染料，確保圖像清晰、背景干凈。

適用范圍廣：適用于細胞、組織切片、糖蛋白芯片、凝集素芯片等不同平臺。

兼容性好：可與FITC、Cy5、DAPI等染料組合用于多通道分析。

四、應用方向

1. 細胞膜糖鏈成像

ConA-CY3 可用于熒光顯微鏡下觀察細胞表面糖鏈分布，特別適用于細胞、干細胞、神經元等類型。

2. 糖蛋白檢測與成像

用于檢測糖蛋白（如IgG、EPO、黏附因子等）中的甘露糖/葡萄糖殘基，可應用于Western blot、芯片雜交、組織染色等。

3. 流式細胞術分析

可用于標記不同細胞群體表面糖鏈表達水平，輔助篩選細胞亞群或疾病表型標志物。

4. 糖芯片與凝集素芯片研究

ConA-CY3作為探針可用于檢測芯片上不同糖結構的結合能力，用于篩選糖類識別模式、生物標志物開發。

5. 細胞粘附與信號傳導研究

ConA 能誘導糖蛋白聚集，結合CY3標簽可實時追蹤糖鏈介導的細胞粘附及信號轉導過程。

6. 疾病模型研究

研究中發現細胞、炎癥細胞表面糖鏈常發生改變，ConA-CY3可用于篩查相關異常表達模式，輔助疾病診斷。

五、使用建議

使用方式 推薦濃度 操作提示

細胞標記 5–25 μg/mL 可用于貼壁或懸浮細胞，標記前建議去除血清殘留

組織染色 10–50 μg/mL 石蠟切片或冰凍切片均可，需加Ca2?/Mn2?維持活性

流式細胞術 1–10 μg/mL 推薦與其他抗體共用，需設陰性對照

糖蛋白檢測 適當優化 根據被檢蛋白糖鏈含量調節濃度

注意事項：

溶液中加入1 mM CaCl? 與1 mM MnCl?可增強結合活性

標記過程中應避免使用甘露糖或葡萄糖等競爭底物

避光操作以防熒光信號衰減

可結合ConA未標記版本設對照組分析結合特異性

六、質量控制標準

檢測項目 指標

蛋白純度 ≥95%（SDS-PAGE）

標記度 1–3 mol Cy3/mol ConA

游離染料殘留 ＜2%（層析檢測）

生物活性 保留原ConA對甘露糖/葡萄糖識別功能

無菌/內毒素版本 可定制

七、包裝與定制服務

規格 形式 儲存條件

100 μg 凍干/液體 -20°C避光

500 μg 凍干/液體 -20°C避光

1 mg 凍干/液體 -20°C避光

可定制 共標、低內毒素、特定標記度

支持服務：

雙染（FITC/Cy3、Cy3/Cy5 等）

定制糖結合強度或低內毒素版本

特殊緩沖體系（Tris、HEPES等）

八、文獻與應用案例

文獻示例：

Zhang et al., Glycobiology, 2022: Cy3-ConA for glycoprotein mapping in cancer cells

Li et al., Bioconjugate Chemistry, 2023: Lectin imaging of neural stem cells using Cy3-ConA

客戶反饋：

“染色圖像清晰，細胞膜成像對比度高”

“用于流式分群效果理想，結合特異性強”

“與Cy5標記抗體組合可用于雙通道糖蛋白共定位研究”

九、結語

ConA-CY3 是一款兼具高特異性識別與熒光成像能力的經典生物試劑，廣泛適用于糖生物學、細胞生物學、標志物篩查、流式檢測等研究。其靈敏、穩定、易于使用的特性，使其成為糖鏈相關科研中的重要工具。如果您有定制需求（如雙標記、低內毒素、封閉糖結合位點等），歡迎聯系我們獲取技術支持與報價信息。

西安齊岳生物 — 多樣化熒光標記服務

西安齊岳生物專業提供各類熒光標記產品及定制服務，覆蓋小分子藥物、蛋白質、多肽、核酸等多種生物分子。我們采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多種主流熒光染料，滿足科研和產業在分子成像、藥物追蹤、機制研究等領域的需求。

西安齊岳生物確保標記分子高效、穩定且保留生物活性。我們支持個性化定制，靈活設計標記方案，快速響應客戶需求。

廠家:西安齊岳生物科技有限公司

用途:科研

狀態：固體/粉末/溶液

產地:西安

溫馨提醒:僅供科研，不能用于人體實驗!

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