基本特性
Biotin-SS-Tyramide 是一種生物素(Biotin)標記的酪胺(Tyramide)衍生物,通過二硫鍵(-SS-)連接。生物素是一種高親和力的配體,能夠特異性地結合鏈霉親和素(Streptavidin),其結合親和力高,解離常數約為 10?1? M。酪胺是一種含有酚羥基的氨基酸衍生物,能夠通過過氧化物酶催化反應與生物分子(如蛋白質或核酸)共價結合。
化學結構與反應機制
Biotin-SS-Tyramide 的化學結構中,生物素通過二硫鍵連接到酪胺上。在過氧化物酶催化下,酪胺的酚羥基可以被氧化生成自由基,進而與生物分子(如蛋白質或核酸)發生共價結合。這種反應稱為酪胺信號放大(TSA)技術,能夠顯著增強信號強度,提高檢測靈敏度。二硫鍵的存在使得生物素可以通過還原劑(如 DTT 或 TCEP)釋放,實現可逆結合。
應用領域
Biotin-SS-Tyramide 廣泛應用于生物醫學研究中。它可以用于免疫熒光、免疫組化和原位雜交等實驗,通過與鏈霉親和素結合實現對目標分子的高靈敏度檢測。例如,在免疫熒光實驗中,Biotin-SS-Tyramide 可以用于標記抗體,通過鏈霉親和素 - 生物素系統的高親和力結合,實現對目標抗原的特異性檢測。在原位雜交中,Biotin-SS-Tyramide 可以用于標記核酸探針,通過鏈霉親和素結合實現對目標核酸的高靈敏度檢測。
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