基本特性
Alexa Fluor 647 Biotin 是一種高亮度、光穩定的熒光染料。它具有獨特的化學結構,其熒光波長較長,發射波長約為 668 nm,激發波長約為 650 nm。這種染料的熒光強度高,能夠在多種熒光顯微鏡和流式細胞儀等設備上實現清晰的成像。由于其光穩定性強,即使在長時間的曝光下,熒光信號也不會快速衰減,非常適合用于長時間的成像實驗。
化學結構與反應性
Alexa Fluor 647 Biotin 的分子結構中包含生物素(Biotin)基團。生物素是一種小分子維生素,具有親和力,能夠特異性地結合鏈霉親和素(Streptavidin)。這種結合非常牢固,其解離常數極低,約為 10^-15 M。因此,Alexa Fluor 647 Biotin 可以通過鏈霉親和素實現對細胞表面或細胞內生物素標記的分子的特異性檢測。這種結合方式在細胞標記、蛋白質定位以及免疫熒光實驗中具有廣泛的應用。
應用領域
在細胞生物學研究中,Alexa Fluor 647 Biotin 可用于標記細胞表面的生物素化蛋白,通過鏈霉親和素的結合實現對細胞表面蛋白的定位和定量分析。例如,在研究細胞信號轉導過程中,可以利用生物素標記細胞表面的受體蛋白,然后通過 Alexa Fluor 647 Biotin 進行熒光標記,觀察受體蛋白在細胞表面的分布變化以及其在細胞內的轉運過程。在免疫熒光實驗中,生物素化的抗體可以通過鏈霉親和素與 Alexa Fluor 647 Biotin 結合,實現對目標抗原的特異性標記和檢測。
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