尼羅藍熒光染料是什么？Nile Blue尼羅藍熒光激發波長是多少？

尼羅藍（Nile Blue）是一種傳統的有機熒光染料，具有良好的熒光特性和親脂性，常用于細胞成像、生物膜染色、線粒體標記以及熒光探針的開發。它與結構類似的染料“尼羅紅（Nile Red）”有相似用途，但在某些應用中顯示出更強的熒光或更穩定的性能。

基本信息

中文名稱：尼羅藍

英文名稱：Nile Blue A、Nile Blue sulfate

分子式：C??H??ClN?O

分子量：349.85 g/mol

CAS號：3625-57-8

激發波長（Ex）：約 635–640 nm

發射波長（Em）：約 660–680 nm

熒光顏色：紅色或近紅外

溶解性：可溶于水、乙醇、DMSO等*性溶劑

應用領域

1.細胞成像

尼羅藍可用于染色細胞質、線粒體或脂質結構，適用于熒光顯微鏡。

具有較高的熒光穿透能力，適合厚組織成像或共聚焦掃描。

2.膜染色

親脂性使其能插入磷脂雙層，用于脂質膜染色和細胞膜示蹤。

在*性環境中熒光較弱，在疏水環境中增強，適合作為膜*性探針。

3.線粒體染色

可被線粒體攝取并積聚，部分實驗中作為線粒體選擇性熒光染料使用。

4.DNA染色（較少用）

與DNA結合后可顯示一定熒光增強，但不如Hoechst或PI敏感。

5.生物傳感

用于開發熒光探針，如檢測pH、*性、脂質含量等的智能染料。

優點

激發/發射波長遠離綠色光區，適用于多重染色實驗

良好的親脂性，可標記細胞膜或疏水結構

熒光較穩定，適用于共聚焦成像和較長時間觀察

缺點與注意事項

與尼羅紅對比

常規染色方法（簡略版）

配制染色液（如：1–10 μM 尼羅藍溶液于PBS或DMSO稀釋液中）

細胞用PBS清洗兩遍，去除培養基

加入染色液，37°C孵育15–30分鐘（避光）

用PBS沖洗2–3次，移入成像緩沖液

使用熒光顯微鏡（Cy5或近紅外通道）觀察

總結

尼羅藍是一種實用的紅色熒光染料，適用于多種生物成像用途，特別是在脂質膜、線粒體和組織成像中表現良好。其遠紅區熒光特性也適用于多染色實驗及組織穿透成像。