TRITC-Dextran

一、基本信息

中文名稱：四甲基羅丹明異硫氰酸酯標記葡聚糖

英文名稱：Tetramethylrhodamine isothiocyanate-Dextran，簡稱 TRITC-Dextran

別稱：TRITC 標記葡聚糖

二、熒光特性

激發與發射波長

TRITC-Dextran 的激發波長通常在 547 - 556nm 左右，發射波長大約在 572 - 578nm，呈現出明亮的橙紅色熒光。這種熒光波長范圍使其在常見的熒光顯微鏡系統中易于檢測和成像，并且與許多其他熒光染料的波長有較好的區分度，便于多色熒光成像實驗。

熒光量子產率與穩定性

熒光量子產率：TRITC 本身具有較高的熒光量子產率，標記到葡聚糖上后，TRITC-Dextran 仍能保持較好的熒光發射性能。在合適的激發條件下，能夠產生較強的熒光信號，有利于在低濃度樣品中進行檢測。

穩定性：TRITC-Dextran 的熒光穩定性受多種因素影響。在避光、低溫（一般 4℃以下）且干燥的環境中儲存時，其熒光強度能夠保持相對穩定。然而，它對光照、高溫、氧化以及某些化學物質較為敏感。長時間暴露在強光下，會發生光漂白現象，熒光強度逐漸降低。同時，pH 值的變化也可能影響其熒光穩定性，在極端 pH 環境下，熒光強度可能會下降。

三、物理化學屬性

外觀：一般為橙紅色固體粉末或溶液，顏色深淺會受到分子量大小、TRITC 標記程度以及溶液濃度的影響。高濃度溶液顏色更深，呈現出鮮艷的橙紅色；低濃度溶液顏色相對較淺。

溶解性

水溶性：TRITC-Dextran 具有良好的水溶性，能夠迅速溶解在水中形成均勻的溶液，便于在生物實驗中直接加入到細胞培養基或生物樣品中進行標記和成像。

有機溶劑溶解性：也可溶于一些極性有機溶劑，如二甲基亞砜（DMSO）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）等，但在非極性有機溶劑中的溶解性較差。

分子量范圍：葡聚糖本身有多種分子量規格，常見的 TRITC-Dextran 分子量范圍從幾千道爾頓到幾百萬道爾頓不等。不同分子量的 TRITC-Dextran 在溶液中的黏度、擴散速度等物理性質不同，小分子量擴散快，適合研究細胞內動態過程；大分子量循環時間長，適用于研究體內分布和代謝。

三、應用領域

（一）生物成像

細胞成像

細胞內吞與分泌研究：將 TRITC-Dextran 加入細胞培養基質中，細胞可通過內吞作用將其攝入。通過熒光顯微鏡觀察其在細胞內的分布和動態變化，可研究細胞內吞和分泌的機制。例如，觀察 TRITC-Dextran 在細胞內的運輸路徑，了解細胞內囊泡運輸的過程。

組織成像

組織切片染色：可用于組織切片的熒光染色，標記特定組織結構或細胞類型。例如，在研究腫瘤組織時，TRITC-Dextran 可以標記腫瘤組織的血管網絡，幫助分析腫瘤的血供特點和生長狀態。

活體組織成像：在小動物淺表組織成像中，TRITC-Dextran 的熒光信號可用于觀察組織微循環和病變區域的代謝變化。

四、應用領域

（一）生物成像

細胞成像

細胞內吞與分泌研究：標記細胞對大分子物質的攝取和釋放過程。例如，將 TRITC-Dextran 加入細胞培養基，觀察細胞如何通過內吞作用將其攝入，并研究內吞途徑和調控機制。

細胞器標記與定位：通過與特定細胞器靶向分子結合，TRITC-Dextran 可用于標記細胞器，研究其在細胞內的動態變化和相互作用。

組織成像

組織切片分析：用于組織切片的熒光染色，觀察組織結構和細胞分布。例如，在研究腫瘤組織時，TRITC-Dextran 可以標記腫瘤血管，分析腫瘤的血供特點。

活體組織成像：在小動物模型中，TRITC-Dextran 可用于淺表組織（如皮膚、黏膜）的成像，研究組織的生理和病理變化。

（二）藥物遞送與載體研究

載體標記與追蹤

藥物載體分布：在構建基于葡聚糖的藥物遞送系統時，TRITC-Dextran 可作為載體標記物，追蹤載體在體內的分布和代謝情況。例如，研究納米顆粒藥物載體在體內的靶向性和滯留時間。

載體性能評估：通過熒光信號分析，評估藥物載體的穩定性和釋放行為，優化載體設計。

藥物釋放監測

在體外模擬實驗中，利用熒光強度變化監測藥物從載體中的釋放過程，繪制釋放曲線，分析釋放機制。

（三）血管與微循環研究

血管通透性研究

注射 TRITC-Dextran 后，通過熒光成像評估血管通透性變化，研究炎癥、腫瘤等疾病對血管屏障的影響。

微血管成像

高分辨率成像技術下，清晰觀察微血管形態、分支和血流情況，為微循環研究提供直觀數據支持。

三、合成方法

化學偶聯法

TRITC 活化：TRITC 染料通過異硫氰酸酯基團與葡聚糖的羥基反應，形成穩定共價鍵。

反應條件優化：需控制溫度（如 37℃）、pH 值（如弱堿性）和反應時間（如數小時），以提高標記效率和產物純度。

純化步驟

反應結束后，通過透析（如 4℃、PBS 緩沖液）或離心除去雜質，獲得純凈的 TRITC-Dextran。

四、優缺點分析

優點

熒光特性優越：橙紅色熒光易于觀察，信號強度高，適合顯微成像。

生物相容性好：葡聚糖基底降低毒性，適合生物醫學研究。

標記效率高：化學偶聯法成熟，適合大規模制備。

缺點

組織穿透性有限：可見光區熒光在深層組織中穿透性差，不適合深層成像。

光穩定性一般：長時間光照下可能發生光漂白，需控制成像時間。

背景熒光干擾：生物樣品中的自發熒光可能影響信號，需優化成像參數（如使用濾光片減少干擾）。

四、應用案例

細胞內吞研究：將 TRITC-Dextran 標記后觀察細胞對示蹤劑的內吞過程，通過熒光顯微鏡觀察其在細胞內的分布和動態變化，有助于理解細胞功能。”

血管通透性研究：

實驗場景：在動物實驗中，通過 TRITC-Dextran 標記觀察血管通透性變化。

結果分析：若炎癥部位熒光信號增強，說明血管通透性增加，為病理研究提供依據。

五、總結

TRITC-Dextran 作為一種重要的熒光標記物，在生物成像、血管研究、藥物遞送系統研究等領域具有廣泛應用價值。盡管存在組織穿透性有限、光穩定性一般等不足，但通過優化實驗條件（如控制光照時間、使用濾光片減少背景干擾），可充分發揮其優勢。未來，隨著熒光技術的進步，TRITC-Dextran 的應用場景將進一步拓展。

以上資料由齊岳生物小編zhn提供，僅用于科研

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