TRITC-Dextran 四甲基羅丹明標記葡聚糖的制備工藝、光譜特性及生物醫學研究中的應用
TRITC-Dextran 是一種將紅色熒光染料 TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯)標記到天然葡聚糖上的熒光探針材料。它具有良好的水溶性、生物相容性和穩定熒光特性,廣泛應用于細胞吞噬實驗、血管滲透性分析、生物屏障研究、組織成像與藥物釋放等領域。
一、基本信息
中文名:TRITC-葡聚糖 / 四甲基羅丹明標記葡聚糖
英文名:TRITC-Dextran (Tetramethylrhodamine isothiocyanate-Dextran)
別稱:四甲基羅丹明異硫氰酸酯-葡聚糖、紅色熒光葡聚糖、TMR-Dextran、Rhodamine T-Dextran
結構組成:天然葡聚糖(Dextran)通過共價鍵連接四甲基羅丹明異硫氰酸酯(TRITC)
二、光學性質
激發波長(λ_ex):540–555 nm
發射波長(λ_em):570–590 nm
熒光顏色:鮮紅色 / 橙紅色
適用激光源:常用 543 nm 或 561 nm 激光,兼容 Cy3/FITC 濾片
TRITC-Dextran 與 RB-Dextran 光譜特性相近,但具有更強的熒光穩定性和更高的信噪比,適合熒光顯微鏡、共聚焦顯微成像和流式細胞分析等實驗。
三、物化屬性
分子量(Dextran):常見規格包括 3 kDa、10 kDa、40 kDa、70 kDa、150 kDa 等
物理形態:橙紅色至粉紅色粉末
溶解性:高度親水,易溶于水、PBS、HBSS、細胞培養基等
穩定性:干燥避光儲存穩定,溶液狀態下需低溫避光保存
連接方式:TRITC 的異硫氰酸酯基團與葡聚糖上的氨基反應形成穩定的硫脲鍵
四、合成方法概述
氨基修飾:將葡聚糖通過氯乙酸、乙二胺(EDA)或己二酰肼(ADH)修飾為氨基化葡聚糖;
偶聯反應:TRITC 在堿性緩沖液(如 pH 8.5 碳酸鹽緩沖液)中與氨基化葡聚糖反應;
純化過程:采用透析袋或層析法去除未結合的游離染料;
干燥保存:冷凍干燥后制得橙紅色粉末狀產物。
五、主要應用領域
細胞吞噬與內吞實驗
用于檢測巨噬細胞、中性粒細胞等免疫細胞對大分子的攝取能力。
血管滲透性與組織屏障研究
TRITC-Dextran 被廣泛用于腦血管屏障(BBB)、腸道屏障、肺泡屏障等研究。
體內/體外熒光成像
通過靜脈注射或組織灌注,實現器官或組織熒光示蹤。
藥物載體釋放機制模擬
作為模型大分子研究藥物釋放與擴散行為。
組織灌注與微循環示蹤
應用于小動物模型中腦、腎、肝等組織的灌注與可視化成像。
生物凝膠/水凝膠滲透研究
被廣泛用于評估凝膠材料對大分子的滲透性與屏障能力。
六、優勢特點
? 強烈紅色熒光,成像清晰
? 高水溶性,便于制備和使用
? 多分子量可選,適配多種研究需求
? 熒光穩定性強,適合長時成像
? 廣泛適用于體內和體外實驗
七、代表性文獻與應用實例
Zlokovic, B. V. et al. TRITC-dextran permeability as a measure of BBB integrity. J. Cereb. Blood Flow Metab., 1990, 10, 678–689.
→ 研究腦血管通透性及神經退行性病變中的屏障破壞。
Galea, J. et al. Use of TRITC-dextran for endothelial permeability assay. Brain Res., 2007, 1147, 39–46.
→ 應用于原代腦微血管內皮細胞通透性分析。
Chen, J. et al. Hydrogel-based model to study TRITC-dextran diffusion and controlled release. Acta Biomater., 2014, 10, 3188–3196.
→ 以水凝膠包封 TRITC-Dextran 模擬大分子藥物釋放機制。
Sarin, H. et al. TRITC-dextran for monitoring of blood-brain barrier permeability in tumors. NeuroImage, 2009, 47, 45–55.
→ 腫瘤腦轉移模型中血管滲漏評估。
八、使用方法與保存建議
推薦使用濃度:0.1–10 mg/mL,依據實驗具體需求;
溶液保存:4°C 避光保存,不建議超過 3–5 天;
粉末保存:–20°C 干燥避光條件下保存,可穩定 1–2 年;
注意事項:避免與金屬離子或強堿性物質長時間接觸,避免高溫;使用前可采用 0.22 μm 濾膜除菌。
總結
TRITC-Dextran 是一種高性能的紅色熒光探針,將 TRITC 染料標記到葡聚糖分子上,兼具良好的水溶性、生物相容性和熒光穩定性。其在血管通透性分析、細胞吞噬實驗、組織灌注成像、藥物釋放研究等方面應用廣泛,是生物醫藥研究中重要的熒光示蹤材料之一。
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