一、基本信息
FITC-PEG-BIOTIN(熒光素-聚乙二醇-生物素)
FITC-PEG-BIOTIN 是一種三功能連接分子,由熒光素(FITC)、聚乙二醇(PEG)和生物素三部分組成。FITC 具備綠色熒光示蹤功能(Ex/Em:495/519 nm),PEG 提供分子柔性和親水性,可增強(qiáng)溶解性與穩(wěn)定性,而生物素能特異性結(jié)合親和素或鏈霉親和素。此構(gòu)造常用于構(gòu)建熒光標(biāo)記的靶向系統(tǒng)、生物成像、納米載體修飾和親和捕獲等研究。適合在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、診斷檢測(cè)或蛋白探針標(biāo)記中使用,兼具識(shí)別與成像雙重功能。
中文名稱:熒光素標(biāo)記聚乙二醇-生物素
英文名稱:FITC-PEG-Biotin
別名:熒光生物素-PEG、FITC-PEG?-Biotin、FITC-PEGylated Biotin
CAS號(hào):無固定CAS(為定制連接分子)
結(jié)構(gòu)類型:FITC—PEG—Biotin(三元功能分子)
二、分子構(gòu)成與說明
FITC-PEG-Biotin 是一種三功能修飾分子,由以下三部分組成:
1. FITC(Fluorescein Isothiocyanate)
提供綠色熒光信號(hào),便于可視化標(biāo)記或熒光成像;
通常通過異硫氰酸酯與氨基反應(yīng)形成穩(wěn)定硫脲鍵。
2. PEG(聚乙二醇)
提高分子親水性和柔韌性;
分子量常用規(guī)格為:PEG? = 500、1000、2000、3400、5000;
通過線性或單端官能化PEG提供空間間隔作用,減少非特異性結(jié)合。
3. Biotin(生物素)
可與鏈霉親和素/親和素高親和結(jié)合(Kd ≈ 10?1? M);
用于靶向捕獲、固定化、免疫分析等生物識(shí)別場(chǎng)景。
三、物化屬性
項(xiàng)目 | 參數(shù) | ||
分子量 | 約 800–6000 Da(取決于 PEG 分子量) | ||
外觀 | 淡黃色至橙黃色固體或粘稠液體(低MW為固體,高MW為粘稠液) | ||
溶解性 | 良好溶于水、PBS、DMSO、DMF、乙醇等;不溶于醚類或烴類溶劑 | ||
熒光激發(fā)波長(zhǎng) | λ_ex ≈ 490–495 nm | ||
熒光發(fā)射波長(zhǎng) | λ_em ≈ 518–520 nm(綠色熒光) | ||
穩(wěn)定性 | 干燥避光條件下穩(wěn)定,溶液中較易光解 | ||
儲(chǔ)存條件 | 干燥粉末建議 -20°C 密閉避光儲(chǔ)存;水溶液推薦分裝于避光小管中冷凍保存 | ||
pH 穩(wěn)定范圍 | *佳使用范圍為 pH 6.5–8.0 |
|
四、制備方法簡(jiǎn)介
FITC-PEG-Biotin 典型合成路線如下:
1. 合成 PEG-Biotin:通過 NHS-Biotin 與氨基修飾 PEG 發(fā)生酰胺鍵反應(yīng);
2. 連接 FITC:使用 FITC 與 PEG-Biotin 末端氨基反應(yīng),形成穩(wěn)定的 FITC-PEG-Biotin;
3. 純化:使用透析、凝膠過濾或 HPLC 純化;
4. 干燥:低溫凍干以便于儲(chǔ)存與運(yùn)輸。
五、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1. 熒光示蹤與成像
可用于細(xì)胞、組織、納米粒子的可視化;
綠色熒光適配多種共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀檢測(cè)系統(tǒng)。
2. 親和素-生物素系統(tǒng)中的熒光標(biāo)記探針
與親和素/鏈霉親和素偶聯(lián)物結(jié)合實(shí)現(xiàn)高親和熒光成像或固定化;
常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕獲、熒光免疫分析等。
3. 納米材料功能化修飾
修飾脂質(zhì)體、納米粒、磁珠、納米膠束、水凝膠等;
提供熒光與靶向雙重功能。
4. PEG藥物載體或蛋白偶聯(lián)劑的構(gòu)建
構(gòu)建熒光示蹤的 PEGylated 載藥系統(tǒng);
也可用于蛋白偶聯(lián)物追蹤研究其體內(nèi)外行為。
六、常見規(guī)格與形式
名稱 | PEG分子量 | 形式 | ||||
FITC-PEG500-Biotin | 500 Da | 固體 | -20°C 避光儲(chǔ)存 | |||
FITC-PEG2000-Biotin | 2 kDa | 固體或粘稠液 | -20°C 避光儲(chǔ)存 | |||
FITC-PEG5000-Biotin | 5 kDa | 粘稠液體 | -20°C 避光儲(chǔ)存 |
七、使用方法建議
建議使用前用 DMSO 或 PBS 溶解至所需濃度;
避光操作,避免強(qiáng)光照射導(dǎo)致熒光團(tuán)降解;
建議現(xiàn)配現(xiàn)用,長(zhǎng)期存放可按 0.1–1 mg/mL 分裝凍存;
配體修飾時(shí),可與胺基表面、蛋白質(zhì)或材料通過親和素連接。
八、中文文獻(xiàn)應(yīng)用實(shí)例
1. 《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》,2021
使用 FITC-PEG-Biotin 修飾多肽探針,通過鏈霉親和素固定于微陣列芯片,用于微量生物標(biāo)志物熒光檢測(cè)。
2. 《分析化學(xué)》,2020
利用 FITC-PEG-Biotin 標(biāo)記磁珠,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞表面糖鏈識(shí)別和富集成像,驗(yàn)證其靈敏性與特異性。
3. 《藥學(xué)學(xué)報(bào)》,2022
在腫瘤靶向納米載藥系統(tǒng)構(gòu)建中,使用 FITC-PEG-Biotin 實(shí)現(xiàn)納米顆粒的雙功能修飾:生物素結(jié)合靶向、FITC熒光示蹤體內(nèi)分布。
九、優(yōu)點(diǎn)總結(jié)
? 同時(shí)具備 親和素結(jié)合能力 + 熒光可視化 + PEG鏈延展性;
? 可在不影響靶點(diǎn)結(jié)合的情況下提升水溶性;
? 操作簡(jiǎn)單、標(biāo)記穩(wěn)定,適合生物傳感、材料修飾和體內(nèi)示蹤。
以上資料由小編zhn提供,僅用于科研
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