DSPE-HYD-MPEG脂質(zhì)體的制備步驟分享(含制備示意圖)
DSPE-HYD-mPEG是一種脂質(zhì)修飾劑,這種化合物常被用于納米藥物輸送系統(tǒng)中,主要具有穩(wěn)定性、生物相容性和低免疫原性等特點(diǎn),可以自組裝成PH敏感的聚合物納米載體。下面是DSPE-HYD-MPEG2000脂質(zhì)體制備方法(詳細(xì)版)
一、材料準(zhǔn)備:
DSPE-HYD-MPEG2000(親水-親脂兩親分子)
輔助脂質(zhì)(可選,如氫化大豆磷脂 HSPC、膽固醇 Cholesterol,調(diào)節(jié)膜流動(dòng)性)
有機(jī)溶劑:氯仿(Chloroform)、甲醇(Methanol)
水相:純水、PBS緩沖液或負(fù)載藥物的溶液
儀器:旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、超聲儀、擠出器(optional)、超濾設(shè)備(optional)
DSPE-HYD-MPEG2000脂質(zhì)體制備示意圖
二、常規(guī)步驟(薄膜水化法):
1. 脂質(zhì)溶解
將DSPE-HYD-MPEG2000、輔助脂質(zhì)(如膽固醇、其他磷脂)按一定摩爾比(例如 DSPE-HYD-MPEG2000 : HSPC : Cholesterol = 5:65:30)稱取。
用氯仿/甲醇混合液(一般體積比2:1)溶解所有脂質(zhì),形成均勻的有機(jī)相溶液。
2. 脂質(zhì)膜形成(旋蒸)
將有機(jī)溶液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中。
在40°C左右緩慢旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),逐漸除去溶劑,形成一層均勻的薄膜附著在瓶壁上。
為確保徹底除去有機(jī)溶劑,可在真空條件下繼續(xù)干燥1–2小時(shí)。
3. 水化
加入水相(如PBS緩沖液、純水,或者含藥物的溶液)。
控溫至40°C左右,充分振蕩或者使用超聲輔助,使脂質(zhì)膜脫離瓶壁形成初步的脂質(zhì)體懸液。
4. 超聲處理(粒徑控制)
用探針式超聲儀或水浴超聲儀進(jìn)行處理(間歇模式,防止過(guò)熱),打碎大脂質(zhì)體。
也可以使用**膜擠出器(extruder)**通過(guò)100 nm、200 nm等聚碳酸酯膜反復(fù)擠出,制備粒徑均一的小脂質(zhì)體。
5. 純化
通過(guò)超濾、離心或者透析方法去除游離未包封的小分子或溶劑殘留。
三、參考脂質(zhì)體配方(例子)
成分 | 摩爾比(mol%) |
HSPC | 55% |
Cholesterol | 35% |
DSPE-HYD-MPEG2000 | 10% |
這個(gè)配比適合制備酸敏感長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體,可根據(jù)不同藥物適當(dāng)調(diào)整。
我們提供DSPE-HYD-MPEG以及同系列試劑:
如:
PLGA-TK-MPEG ;聚丙交酯乙交酯共聚物-酮縮硫醇-甲氧基聚乙二醇
Biotin-TK-NH2 ;羧基-酮縮硫醇-生物素
COOH-TK-NHS ;羧基-酮縮硫醇-活性酯
COOH-TK-NH2 ;羧基-酮縮硫醇-氨基
COOH-PEG-TK-NH2; 羧基-聚乙二醇-酮縮硫醇-氨基
COOH-PEG-TK-COOH ;羧基-聚乙二醇-酮縮硫醇-羧基
AC-TK-AC ;丙烯酰亞胺-酮縮硫醇-丙烯酰亞胺
MPEG-TK-COOH; 甲氧基聚乙二醇-酮縮硫醇-羧基
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