DSPE-HYD-MPEG脂質體的制備步驟分享(含制備示意圖)
DSPE-HYD-mPEG是一種脂質修飾劑,這種化合物常被用于納米藥物輸送系統中,主要具有穩定性、生物相容性和低免疫原性等特點,可以自組裝成PH敏感的聚合物納米載體。下面是DSPE-HYD-MPEG2000脂質體制備方法(詳細版)
一、材料準備:
DSPE-HYD-MPEG2000(親水-親脂兩親分子)
輔助脂質(可選,如氫化大豆磷脂 HSPC、膽固醇 Cholesterol,調節膜流動性)
有機溶劑:氯仿(Chloroform)、甲醇(Methanol)
水相:純水、PBS緩沖液或負載藥物的溶液
儀器:旋轉蒸發儀、超聲儀、擠出器(optional)、超濾設備(optional)
DSPE-HYD-MPEG2000脂質體制備示意圖
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二、常規步驟(薄膜水化法):
1. 脂質溶解
將DSPE-HYD-MPEG2000、輔助脂質(如膽固醇、其他磷脂)按一定摩爾比(例如 DSPE-HYD-MPEG2000 : HSPC : Cholesterol = 5:65:30)稱取。
用氯仿/甲醇混合液(一般體積比2:1)溶解所有脂質,形成均勻的有機相溶液。
2. 脂質膜形成(旋蒸)
將有機溶液置于旋轉蒸發瓶中。
在40°C左右緩慢旋轉蒸發,逐漸除去溶劑,形成一層均勻的薄膜附著在瓶壁上。
為確保徹底除去有機溶劑,可在真空條件下繼續干燥1–2小時。
3. 水化
加入水相(如PBS緩沖液、純水,或者含藥物的溶液)。
控溫至40°C左右,充分振蕩或者使用超聲輔助,使脂質膜脫離瓶壁形成初步的脂質體懸液。
4. 超聲處理(粒徑控制)
用探針式超聲儀或水浴超聲儀進行處理(間歇模式,防止過熱),打碎大脂質體。
也可以使用**膜擠出器(extruder)**通過100 nm、200 nm等聚碳酸酯膜反復擠出,制備粒徑均一的小脂質體。
5. 純化
通過超濾、離心或者透析方法去除游離未包封的小分子或溶劑殘留。
三、參考脂質體配方(例子)
成分 | 摩爾比(mol%) |
HSPC | 55% |
Cholesterol | 35% |
DSPE-HYD-MPEG2000 | 10% |
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這個配比適合制備酸敏感長循環脂質體,可根據不同藥物適當調整。
西安瑞禧生物提供DSPE-HYD-MPEG以及同系列試劑:
如:
DSPE-Hyd-PEG ; 磷脂-腙鍵-聚乙二醇
DSPE-Hyd-PEG-NHS-FITC; 磷脂-腙鍵-聚乙二醇-活性酯-熒光素
DSPE-Hyd-PEG-cRGD ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-環肽cRGD
DSPE-Hyd-PEG-iRGD ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-環肽iRGD
DSPE-Hyd-PEG-RGD ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-RGD肽
DSPE-Hyd-PEG-FITC ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-熒光素
DSPE-Hyd-PEG-CY7 ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-花菁素CY7
DSPE-Hyd-PEG-CY5.5 ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-花菁素CY5.5
DSPE-Hyd-PEG-CY5 ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-花菁素CY5
DSPE-Hyd-PEG-SH ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-巰基
DSPE-Hyd-PEG-Biotin ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-生物素
DSPE-Hyd-PEG-CY5 ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-CY5
DSPE-Hyd-PEG-SH ;磷脂-腙鍵-聚乙二醇-巰基
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