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產品名稱:FITC-PEOz-N?;熒光素異硫氰酸酯-聚(2-乙基-2-噁唑啉)-疊氮化物
1. 結構設計
FITC(熒光標記):
熒光素異硫氰酸酯(FITC),提供綠色熒光(λ_ex~495 nm,λ_em~525 nm),用于成像、示蹤或定量分析。
PEOz(親水間隔臂):
抗蛋白吸附的聚(2-乙基-2-噁唑啉),作為柔性鏈段隔離FITC與N?,減少空間位阻和熒光淬滅。
N?(點擊化學基團):
疊氮基團(-N?),通過無銅點擊化學(如SPAAC)或銅催化疊氮-炔環加成(CuAAC)與炔烴、環辛炔等反應,用于偶聯生物分子(如抗體、藥物、納米材料)。
2. 合成策略
雙端修飾法:
步驟1:通過陽離子開環聚合合成PEOz-N?(如使用疊氮化鈉取代PEOz-OTs)。
步驟2:將FITC的異硫氰酸酯基團與PEOz末端的氨基反應(pH 8-9,避光),形成FITC-PEOz-N?。
保護-脫保護法:
步驟1:合成PEOz-NH?(氨基末端)。
步驟2:通過Boc保護部分氨基,與FITC反應后脫保護。
步驟3:剩余氨基轉化為疊氮基團(如通過重氮化反應)。
3. 關鍵性質
光學性能:
FITC熒光強度受PEOz鏈長影響(短鏈保留亮度,長鏈可能淬滅)。
反應活性:
N?在生理條件下穩定,可通過SPAAC(無需催化劑)或CuAAC高效反應。
抗污性:
PEOz鏈屏蔽FITC和N?,減少非特異性蛋白吸附。
生物相容性:
PEOz通過FDA認證,FITC和N?常用生物標記試劑。
4. 表征與優化方向
結構驗證:
NMR:確認PEOz鏈長、FITC/N?接枝率及位置。
UV-Vis:定量FITC標記密度(λ_abs~495 nm)。
IR/Raman:檢測N?特征峰(~2100 cm?1)。
性能評估:
熒光量子產率:比較自由FITC與FITC-PEOz-N?的亮度。
點擊反應效率:通過HPLC或熒光標記檢測環加成產率。
血清穩定性:驗證PEOz抗污性對熒光信號的維持作用。
挑戰與優化:
鏈長調控:平衡PEOz親水性與FITC熒光強度(推薦DP=20-50)。
正交修飾:確保FITC和N?分別修飾在PEOz兩端(需保護-脫保護策略)。
儲存條件:避光低溫保存,防止FITC光漂白及N?緩慢分解。
溫馨提示:僅用于科研,不能用于人體實驗!wyh
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