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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷的實(shí)驗(yàn)手冊(cè)
發(fā)布時(shí)間:2021-02-03     作者:yyp   分享到:

名稱:X-Gal 5--4--3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

其他名稱:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-α-D-

galactopyranoside5--4--3-叼噪-α-D-吡喃半乳糖苷;X-α-D-Galactoside X-a-D-半乳糖苷

規(guī)格:25mg

運(yùn)輸溫度:冰袋

保存溫度:-20°C避光干燥

**期:2

應(yīng)用:α-半乳糖苷酶顯色底物

產(chǎn)品描述:

X-a-Gal (5--4-氯…-3-引味-α-D-吩喃半乳糖苷,CAS :107021-38-5),一種用來(lái)檢測(cè)α-半乳糖苷酶(也稱為蜜二糖酶,a~-D-半乳糖苷半乳糖水解酶,EC 3.2.1.22)活性的顯色底物。X-a-Gal的使用,避開(kāi)雙雜交分析中β-半乳糖苷酶溶液制備和濾膜提升實(shí)驗(yàn)( filter-lift assay )/的繁瑣操作,只需直接添加在培養(yǎng)基上,通過(guò)藍(lán)色沉淀的生成與否,即可用來(lái)檢測(cè)雙雜交相互作用。X-a-Ga可用來(lái)區(qū)分腸桿菌科內(nèi)的不同物種以及劃分乳酸菌和雙歧桿菌。組織學(xué)研究中,X-a-Gali還可借助光學(xué)顯微鏡來(lái)檢測(cè)組織的α-半乳糖苷酶活性。

利用α-半乳糖苷酶水解二糖-蜜二糖作為碳源,酵母菌得以正常生長(zhǎng)或進(jìn)行發(fā)酵。釀酒酵母菌內(nèi),該酶由幾種GAL基因調(diào)控的MEL1基因所編碼。一旦GAL4款活,α-半乳糖苷酶分泌,之后水解培養(yǎng)基上的X-a-Gal,使得菌落產(chǎn)生藍(lán)斑。酵母雙雜交研究用的工程菌包括AH109PJ69-2AY190Y187。

我司(齊岳生物)提供兩種形式的產(chǎn)品,達(dá)分子生物學(xué)級(jí),高純(>98%TLC) :

一種以凍干粉形式提供。

一種以溶于DMF的儲(chǔ)存液形式提供,濃度為20mg/M L

產(chǎn)品特性:

1 ) CAS  : 107021-38-5

2)化學(xué)名:5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-a-D-galactopyranoside5--4--3-例除-a-D~吮喃半乳糖苷﹔X-a-D-Galactoside X-a-D-半乳糖苷;

3)分子式:C14H15BrCINO6

4)分子量:408.64g/mol

5)純度:98% ( TLC)

6)外觀:白色或近白色結(jié)晶粉末

7)溶解性:溶于DMF ( 20 mg/ml )

8)化學(xué)結(jié)構(gòu)式:

image.png

保存與運(yùn)輸方法

保存:粉末-20°C避光干燥保存,2年**。運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。

使用方法

方法1∶直接倒入固體培養(yǎng)基

溶解60mgX-α-gal3ml DMF20mg/ml儲(chǔ)存液,馬上使用或者避光儲(chǔ)存于-20°℃,6個(gè)月穩(wěn)定;將高壓滅菌好的瓊脂培養(yǎng)基于室溫冷卻至50C ;

按照每升培養(yǎng)基加入1ml 20mg/mlX-α-gal儲(chǔ)存液的用量,直接加入冷卻好的瓊脂培養(yǎng)基﹔【若有需要,此時(shí)也可加入篩選用的抗生素】﹔倒平板,使用前必須讓培養(yǎng)基室溫凝固(通常至少需30min )

方法2∶涂布于預(yù)制培養(yǎng)平板上

溶解24mg X-α-gal6ml DMF4mg/ml儲(chǔ)存液,馬上使用或者避光儲(chǔ)存于-20°C℃,6個(gè)月穩(wěn)定﹔超凈工作臺(tái)內(nèi)放置已經(jīng)倒好的固體培養(yǎng)基,使其表面干燥;

吸取20Opul(15cm平板)10opl ( 10cm平板) 4mg/ml X-α-gal儲(chǔ)存液于預(yù)制培養(yǎng)平板上,并涂布使其均勻分散在表面【注意:平板邊絳通常很難得以充分涂布,可能導(dǎo)致假陽(yáng)性克隆生成。建議條件可能下,于平板中央挑取克隆】。

使用前將上述涂布好的篩選平板于超凈工作臺(tái)內(nèi),至少晾干30min ;

將轉(zhuǎn)化好的細(xì)菌或酵母涂于平板上,分別置于37℃或30℃倒置培養(yǎng),直至藍(lán)色菌落出現(xiàn)。

注意事項(xiàng):

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

供應(yīng)產(chǎn)品目錄:

畢赤酵母MGYH平板

畢赤酵母MGY平板

畢赤酵母MMH平板

畢赤酵母MM平板

畢赤酵母PAD平板

畢赤酵母RDH培養(yǎng)基

畢赤酵母RDH平板

畢赤酵母RD培養(yǎng)基

畢赤酵母RD平板

畢赤酵母篩選培養(yǎng)基套裝(PichiaPink表達(dá)系統(tǒng))

剛果紅YPD平板(9cm)

缺精氨酸APG培養(yǎng)基(含半乳糖,-Ura)

EMMG培養(yǎng)基(含谷氨酸鈉)

EMMS培養(yǎng)基(含山梨醇)

EMM培養(yǎng)基(鈣鎂糖提供無(wú)菌母液)

EMM培養(yǎng)基(過(guò)濾除菌)

EMM培養(yǎng)基(需過(guò)濾除菌)

SDC液體培養(yǎng)基(酵母衰老實(shí)驗(yàn))

YE Agar Medium

YE Medium

YEP Agar Medium

YEP Medium

YEPM Agar Medium/YPM Agar Medium

YEPM Medium/YPM Medium

YES Agar Medium

YES Medium

YPDS Liquid Medium

YPS Agar Medium/YEPS Agar Medium

YPS Medium/YEPS Medium

低糖EMM培養(yǎng)基

酵母MM培養(yǎng)基/無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基(2×)

缺磷EMM培養(yǎng)基

無(wú)糖EMM培養(yǎng)基

yyp2021.2.3

庫(kù)存查詢
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