酵母單雜交及雙雜交系統(tǒng)
酵母單雜交系統(tǒng)主要用來分離鑒定與特異 DNA 序列結(jié)合作用的蛋白質(zhì)并同時獲得其編碼基 因 。酵母單、雙雜交系統(tǒng)均利用了許多真核生物 轉(zhuǎn)錄激活因子 (transcription activator) ,如 GAL4 的 獨特結(jié)構(gòu)特點 ,即自身含有功能上必須的兩個獨立 結(jié)構(gòu)域2DNA 結(jié)合域與轉(zhuǎn)錄激活域。
在酵母單雜交 系統(tǒng)中 ,與轉(zhuǎn)錄激活域融合的結(jié)合蛋白與靶 DNA 序列的相互作用可以同樣激活報道基因的表達(dá) ,而 酵母雙雜交系統(tǒng)中則利用此特點可以構(gòu)建兩種雜合 蛋白 ,一種為已知蛋白 X 與 DNA 結(jié)合域融合的雜 合蛋白 ,一種為未知蛋白 Y與轉(zhuǎn)錄激活域間的融合 蛋白。當(dāng)編碼此兩種相應(yīng)雜合蛋白的表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入 酵母后 ,如果蛋白 X 和 Y 之間存在相互作用 ,則表 達(dá)產(chǎn)生的兩種雜合蛋白會由于這種相互作用使其中 的轉(zhuǎn)錄激活域進入其正常作用的啟動子 (UASG) 位 點而激活報道基因的表達(dá)(如 lacZ) 。其作用模式簡 圖見圖 1。
酵母三雜交系統(tǒng)
生物學(xué)中常常利用小的有機配體來研究闡明許 多生物學(xué)過程 ,如信號傳導(dǎo)和細(xì)胞分化調(diào)控等的發(fā) 生機制 ,配體2受體間的相互作用也是醫(yī)藥工業(yè)中藥 物設(shè)計的基礎(chǔ)。一旦某一受體被證明與某一疾病相 關(guān) ,尋找能與此受體結(jié)合并調(diào)節(jié)其功能的配體小分子就顯得極為重要 ,因為這些配體分子可以作為被 開發(fā)**的**目標(biāo)。在酵母雙雜交系統(tǒng)的基礎(chǔ) 上 ,Licitra 等結(jié)合合成有機化學(xué)生產(chǎn)的異源雜交配 體 ,建立了一種體內(nèi)分析配體受體相互作用的三雜 交系統(tǒng)[8 ] 。這種系統(tǒng)不僅可以用來迅速分離鑒定 與已知配體分子相互作用的受體編碼 cDNA 基因 , 而且還能篩選已知受體的未知配體分子。其作用模 式見圖 2。
供應(yīng)產(chǎn)品目錄:
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp Broth
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp Broth
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura Broth
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp Broth
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/-Ura Broth
SD/-Ade/-His/-Met Broth
SD/-Ade/-His/-Trp Broth
SD/-Ade/-Leu Broth
SD/-Ade/-Leu/-His Broth
SD/-Ade/-Leu/-Trp Broth
SD/-Ade/-Trp Broth
SD/-Ade/-Ura Broth
SD/-Arg/-His/-Leu/-Lys/-Ura Broth
SD/-Arg/-Leu/-Ura Broth
SD/-Cys/-Met Broth
SD/-Glu/-Ura Broth
SD/-His Broth
SD/-His/-Leu Broth
SD/-His/-Leu/-Lys/-Met/-Ura Broth
SD/-His/-Leu/-Met/-Trp Broth
SD/-His/-Leu/-Met/-Trp/-Ura Broth
SD/-His/-Leu/-Met/-Ura Broth
SD/-His/-Leu/-Trp Broth
SD/-His/-Leu/-Trp/-Ura Broth
SD/-His/-Leu/-Ura Broth
SD/-His/-Trp Broth
SD/-His/-Trp/-Ura Broth
SD/-His/-Ura Broth
SD/-Leu Broth
SD/-Leu/-Met Broth
SD/-Leu/-Met/-Trp Broth
SD/-Leu/-Met/-Trp/-Ura Broth
SD/-Leu/-Met/-Ura Broth
SD/-Leu/-Trp Broth
SD/-Leu/-Trp/-Ura Broth
SD/-Leu/-Ura Broth
SD/-Met Broth
SD/-Met/-Trp/-Ura Broth
SD/-Met/-Ura Broth
yyp2021.2.2