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吉姆薩染色液染色步驟分析
發(fā)布時(shí)間:2021-01-22     作者:zzj   分享到:

吉姆薩染色原理

吉姆薩染液是由天青與伊紅組成。各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同,對各種染料的親和力也不一樣。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,被染成粉紅色;嗜堿性顆粒如細(xì)胞核蛋白或淋巴細(xì)胞胞漿為酸性物質(zhì),與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,被染成紫藍(lán)色;中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合,呈淡紫色。各類成分由于自身特性與吉姆薩染液中不同物質(zhì)結(jié)合呈現(xiàn)不同顏色從而得以區(qū)分。吉姆薩染色液可將細(xì)胞核染成紫紅色或藍(lán)紫色,胞漿染成粉紅色,在光鏡下呈現(xiàn)出清晰的細(xì)胞染色圖像。

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染液配制

吉姆薩(Giemsa'sstain;天青-伊紅)染色

1、吉姆薩染料是伊紅(AzurIIEqsin) 和天青(藍(lán))2號合成的。

2、吉姆薩染料(Giemsa,天青-伊紅)染液配制:

吉姆薩染料(粉末) 0.5g 或 7.5g

甲醇( AR ) 33ml 或 500ml

甘油( AR ) 33ml 或 500ml

先將吉姆薩染料放入乳缽中,逐漸倒甘油研磨溶于甘油中,置于 56℃水溫箱內(nèi),90~120分鐘,然后加入甲醇,搖勻后放置數(shù)天,過濾后或不過濾即可使用。保存于棕色瓶中。一般兩周后使用為好。臨用時(shí)將貯備液與 pH 6.8的磷酸緩沖液按照 1:20混合。


染色步驟

1、將制備好的細(xì)胞涂片放置染色架上,滴加稀釋好的染色液使其覆蓋全部血膜,室溫染色15~30min。

2、用自來水緩慢從玻片一端沖洗 (注意勿先倒去染液或直接對血膜沖洗 ),晾干后鏡檢。

 

注意事項(xiàng):

1、請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2、如果染色過濃或者過淡,請自行調(diào)整染色時(shí)間或吉姆薩工作液濃度。

3、原液稀釋后可能會出現(xiàn)少量沉淀,不影響使用;染色結(jié)束用水洗凈即可。

4、吉姆薩原液采用常規(guī)方法配制并用濾紙過濾,請?jiān)谑褂脮r(shí)不要接觸到水。否則時(shí)間長了會失效。

5、PH對細(xì)胞染色有影響。染色用載玻片必須清潔,無酸堿污染以免影響染色結(jié)果。


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以上內(nèi)容來自小編zzj 2021.1.22

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