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外泌體(Exosome)直徑為30~100 nm左右的細胞外囊泡
發布時間:2020-12-31     作者:wyf   分享到:

外泌體概要

外泌體(Exosome)是指經由細胞內的囊泡運輸,從多泡體(Multivesicular body,MVB) 排出到細胞外的直徑為30~100 nm左右的細胞外囊泡(Extracellular vesicle,EV)。

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外泌體的膜表面上多表達一種四次跨膜蛋白(Tetraspanin),已知CD9CD63分子為一般外泌體的標志物。外泌體內部含有蛋白質、脂質、核酸等。被分泌到細胞外后,經由血液、尿液和唾液等體液被相鄰或遠離的組織吸收,從而發揮著細胞間信息傳遞載體的作用。

 

最近的研究證明外泌體中存在miRNA后,外泌體由來的miRNA的分析與細胞、組織特異性、以及與疾病間的聯系引起了人們的廣泛關注。現在,在以**癥等為代表的各類疾病中,利用外泌體由來的分子開發診斷試劑或將其作為**開發靶點,或是將外泌體作為**釋放系統的工具加以利用,這些聚焦于外泌體的研究正在不斷發展。

 

外泌體的分離方法

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超速離心法

多聚物沉淀法

免疫沉淀法

方法

? 利用分子的大小比重物理法離心

? 使用多聚物的沉淀法

? 運用磁珠法特異性吸附外泌體表面抗原進行沉淀分離

優點

? 至今為止常用的方法

? 可大量提取

? 可使用的樣品種類較多

? 低成本

? 操作簡單

? 時間較短

? 不需要特別的儀器

? 操作簡單

? 時間較短

? 雜質較少,純度高

? 可以使用膜上蛋白對應的特異性抗體進行回收

缺點

? 操作比較繁雜,時間較長(半天~兩天)

? 雜質較多

? 根據使用的離心管的材料,可能會因壁上的吸附造成損耗

? 較難同時檢測不同樣品

? 需要超速離心機

? 雜質較多

? 從血清血漿中回收外泌體需要分別使用不同的試劑進行回收

? 外泌體的回收效果依靠抗體的性能


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