文獻：寡聚荷正電氨基酸修飾的基因遞送納米脂質載體的構建和初步評價

作者：張雪敬

文獻鏈接: https://d.wanfangdata.com.cn/thesis/Y2582217

摘要：

本文合成了能高效提高轉染效率的DC-Chol，以及賦予脂質體pH敏感性能的CHEMS，對其化學結構進行表征。將DSPE-PEG(2000)與CPP共軛連接，得到導向性脂材DSPE-PEG-CPP，以提高脂質體對細胞的攝取能力。構建了一種能使siRNA沖破內涵體逃逸障礙，避免被溶酶體滅活的CPP修飾載壓縮物脂質體CL2，和一種CPP修飾的非載壓縮脂質體CL1，并對其進行表征和初步的評價。　

方法:　　

1.膽固醇氯甲酸酯和過量N，N-二甲基乙二胺分別溶于無醇氯仿中，0-4℃冰水浴條件下反應。TLC監測反應進程，待膽固醇氯甲酸酯反應完全后終止反應（約2h），旋蒸揮干溶劑，干燥后用熱絕對乙醇重結晶兩次純化并真空干燥。　　

2.膽固醇與過量的丁二酸酐溶于20mL甲苯， DMAP作為催化劑，加熱回流反應3h。旋轉蒸發揮干溶劑，干燥后重結晶兩次，得到灰色產品。　　

3.Mal-PEG-DSPE用氯仿-甲醇(3∶1)溶解，旋轉成膜，HBS(pH6.5)溶液3.0mL水化，和CPP肽溶液(5mg溶于HBS(pH6.5)2.0mL)混合，攪拌反應48h，加入半胱氨酸適量繼續攪拌4h，透析2d，冷凍干燥。　　

4.空白脂質體單因素考察，通過固定膜材總量;DOPE∶CHEMS比例的篩選;添加Chol對制劑的影響;水化液選擇;超聲時間的選擇，最終確定空白脂質體制備方法。　　

5.構建非壓縮載藥脂質體(NL1/CL1)和載壓縮物脂質體(NL2和CL2)，并進粒徑、電位和電鏡表征。

結論:　　

實驗結果表明，DC-Chol以及CHEMS合成路線可靠，產率分別為60.3％、78％，產品純度較高，重現性高。　　

由Ellman試劑判斷反應進程，質譜測定得出的分子離子峰推測產物結構，成功地將CPP共軛連接到DSPE-PEG(2000)中的PEG遠端，得到增強細胞穿透能力的導向性脂材DSPE-PEG(2000)-CPP。　

成功地制備了四組遞送siRNA的遞送納米脂質載體CPP修飾非壓縮載藥脂質體(NL1)、普通修飾非壓縮載藥脂質體(NL2)、普通修飾在壓縮物脂質體(CL1)、CPP修飾載壓縮物脂質體(CL2)。　　

四組制劑均提高了細胞攝取效率。普通脂質體與CPP修飾的脂質體的細胞攝取相對較高，但差異并不顯著。導致這個結果的可能的原因是，如DSPE-PEG-CPP合成產物中有較多剩余脂材原料，反應條件有待進一步優化，產物純度有待提高。

相關推薦：

DOPE-PEG-Mal

Palmitic acid-PEG-Mal

STA-PEG-Mal

CLS-PEG-Mal

8-ArmPEG-(2ARM-Mal,6ARM-Biotin)

2-ArmPEG-Mal

8-ArmPEG-Mal

4-ArmPEG-Mal

mPEG-Mal CAS No.: 99126-64-4

PLGA(30K)-PEG-NH-Mal

PLGA(15K)-PEG-Mal

Glucose-PEG-NH-MAL

以上文章內容來源各類期刊或文獻，如有侵權請聯系我們刪除！