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DSPE-PEG-RGD膠束在細胞攝取中的內化特征研究
發布時間:2025-06-27     作者:zyl   分享到:

文獻:

Targeting Fluorescence Imaging of RGD-Modified Indocyanine Green Micelles on Gastric Cancer

文獻鏈接:

https://www.frontiersin.org/journals/bioengineering-and-biotechnology/articles/10.3389/fbioe.2020.575365/full

作者:

Jun Shao&#x;Jun Shao1?Xiaoming Zheng&#x;Xiaoming Zheng1?Longbao FengLongbao Feng2Tianyun LanTianyun Lan3Dongbing DingDongbing Ding1Zikai CaiZikai Cai1Xudong ZhuXudong Zhu1Rongpu LiangRongpu Liang1Bo Wei*Bo Wei1*

細胞系和小鼠

本文使用SGC7901細胞、小鼠成纖維細胞L929。SGC7901細胞在RPMI 1640中培養,而L929細胞在37°C、含5%CO2的加濕氣氛中在DMEM中培養。所有培養基均補充了10%FBS、1%青霉素和1%鏈霉素。

細胞攝取

通過激光共聚焦熒光顯微鏡觀察細胞的內化和分布。簡而言之,將SGC7901細胞接種在35 mm細胞培養皿(Nest,801002)中,培養24小時以進行細胞附著。每皿細胞密度為5×104。

接下來,用含有以下成分的新無血清培養基替換培養基DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG(等效ICG濃度:1mg/ml)。孵育4和12小時后,用PBS洗滌細胞,并用4%多聚甲醛固定。

DSPE-PEG-RGD

隨后,細胞用10μg/ml DAPI染色10分鐘,并用PBS洗滌。最后,使用激光共聚焦熒光顯微鏡(Zeiss LSM 710,德國)觀察膠束的結合和內化。核的參數設置為λex 405 nm,ICG的參數設置在λex 633 nm。

為了進一步定量分析,將1×105個SGC7901細胞接種在每孔12孔板中,并用含有以下成分的無血清培養基培養DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG(等效ICG濃度:1mg/ml)處理12小時。在預定時間,收獲細胞并用PBS洗滌。然后,將細胞重新懸浮在PBS中,并立即通過Accuri流式細胞術進行定量分析。

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